В зависимости от разновидностей антигенов, входящих в состав кровяных телец (эритроцитов) определяется конкретная группа крови. У каждого человека она постоянна и не изменяется с рождения до смерти.

Количество эритроцитов определяет группу крови

Кто открыл группу крови у человека

Идентифицировать класс биологического материала человека получилось у австрийского иммунолога Карла Ландштейнера в 1900 году. В это время было определено только 3 разновидности антиген в мембранах эритроцитов – А, В и С. В 1902 году получилось выявить 4 класс эритроцитов.

Карл Ландштейнер первым открыл группы крови

Карл Ландштейнер смог сделать ещё одно важное достижение в медицине. В 1930 году учёный в тандеме с Александром Винером открыл резус-фактор крови (отрицательный и положительный).

Классификация и характеристика групп крови и резус-фактора

Групповые антигены классифицируются по единой системе АВ0 (а, б, ноль). Установленная концепция разделяет состав кровяных телец на 4 основных вида. Их отличия в альфа и бета агглютининах в плазме, а также присутствие специфических антигенов на оболочке эритроцитов, которые обозначаются буквами А и В.

Таблица «Характеристика классов крови»

На групповую принадлежность национальность или раса людей не влияет.

Резус-фактор

Помимо системы АВ0, биологический материал классифицируют по фенотипу крови – наличию или отсутствию в ней специфического антигена D, который называется резус-фактором (Rh). Кроме белка D, система Rh охватывает ещё 5 основных антиген – C, c, d, E, e. Они содержатся во внешней оболочке эритроцитов.

Резус-фактор и класс кровяных телец закладываются у ребёнка ещё в утробе матери, и передаются ему от родителей на всю жизнь.

Методика определения группы крови и резус-фактора

Методы выявления групповой принадлежности

Для обнаружения в эритроцитах специфических антигенов используется несколько методов:

• простая реакция – берётся стандартная сыворотка 1, 2 и 3 класса, с которой сравнивается биологический материал пациента;
• двойная реакция – особенностью методики является использование не только стандартных сывороток (сравниваются с исследуемыми кровяными тельцами), но и стандартных эритроцитов (сопоставляются с сывороткой пациента), которые предварительно готовятся в центрах переливания крови;
• моноклинальные антитела – используются циклоны анти-А и анти-В (готовятся при помощи генной инженерии из крови стерильных мышей), с которыми сравнивается исследуемый биологический материал.

Метод выявления группы крови по моноклинальным антителам

Сама специфика исследования плазмы на предмет её групповой принадлежности заключается в сравнении образца биологического материала пациента со стандартной сывороткой или стандартными эритроцитами.

Последовательность такого процесса следующая:

• забор венозной жидкости натощак в количестве 5 мл;
• распределение стандартных образцов на предметном стекле или специальной тарелке (каждый класс подписывается);
• параллельно образцам размещается кровь пациента (количество материала должно быть в несколько раз меньше объема капель стандартной сыворотки);
• смешивается кровяная жидкость с заготовленными образцами (простая или двойная реакция) или с циклонами (моноклинальные антитела);
• через 2,5 минуты в те капли, где произошла агглютинация (образовались белки группы А, В или АВ) добавляется специальный физраствор.

Наличие агглютинации (склеивание и выпадение в осадок эритроцитов с соответствующими антигенами) в биологическом материале даёт возможность отнести эритроциты к тому или иному классу (2, 3, 4). А вот отсутствие такого процесса свидетельствует о нулевом (1) виде.

Как определить резус-фактор

Существует несколько методов выявления Rh-принадлежности – использование антирезусных сывороток и моноклинального реагента (белков группы D).

В первом случае порядок проведения следующий:

• забор материала происходит из пальца (допускается использование консервированной крови или самих эритроцитов, которые образовались после отстаивания сыворотки);
• в пробирку помещается 1 капелька антирезусного образца;
• в заготовленный материал наливается капля исследуемой плазмы;
• небольшое взбалтывание позволяет сыворотки равномерно расположиться в стеклянной таре;
• спустя 3 минуты в тару с сывороткой и исследуемыми кровяными тельцами добавляется раствор натрия хлорида.

После нескольких переворачиваний пробирки, специалист проводит расшифровку. Если агглютинины появились на фоне осветлённой жидкости, речь идёт о Rh+ — положительном резус-факторе. Отсутствие изменений в цвете и консистенции сыворотки свидетельствует об отрицательном Rh.

Определение группы крови по системе резус

Изучение резуса при помощи моноклинального реагента подразумевает использование цоликлон анти-D супер (специальный раствор). Порядок проведения анализа включает несколько этапов.

1. Реагент (0,1 мл) наносится на подготовленную поверхность (тарелку, стекло).
2. Рядом с раствором помещается капля крови пациента (не больше 0,01 мл).
3. Две капли материала смешиваются.
4. Проведение расшифровки происходит через 3 минуты с начала исследования.

У большинства людей на планете в эритроцитах присутствует агглютиноген системы резус. Если рассматривать в процентах, то у 85% реципиентов есть белок D и они являются резус-положительными, а у 15% он отсутствует – это резус-отрицательный фактор.

Совместимость

Совместимость крови являет собой соответствие по группе и резус-фактору. Такой критерий очень важен при переливании жизненно важной жидкости, а также в период планирования беременности и вынашивании плода.

Какая группа крови будет у ребёнка

Наука генетика предусматривает наследование детьми групповой принадлежности и резуса от родителей. Гены передают информацию о составе кровяных телец (агглютинин альфа и бета, антигенов А, В), а также о Rh.

Таблица «Наследование групп крови»

Родители	Ребёнок
	1	2	3	4
1+1	100
1+2	50	50
1+3	50		50
1+4		50	50
2+2	25	75
2+3	25	25	25	25
2+4		50	25	25
3+3	25		75
3+4		25	50	25
4+4		25	25	50

Смешение групп эритроцитов с различными Rh ведёт к тому, что у ребёнка резус-фактор может быть как «плюс», так и «минус».

1. Если Rh одинаковый у супругов (присутствуют антитела группы D) – дети в 75% унаследуют доминирующий белок, а в 25% он будет отсутствовать.
2. В случае отсутствия специфического белка D в оболочках эритроцитов мамы и папы ребёнок также будет резус-отрицательным.
3. У женщины Rh-, а у мужчины Rh+ – сочетание предполагает наличие или отсутствие резуса у ребёнка в соотношении 50 на 50, при этом возможен конфликт антиген мамы и малыша.
4. Если у матери Rh+, а у отца анти-D отсутствует – резус передастся малышу с вероятностью 50 на 50, но риска конфликта антител нет.

Важно понимать, что резус-фактор передаётся на генетическом уровне. Поэтому, если родители резус-положительные, а ребёнок родился с Rh-, мужчинам не стоит спешить ставить под сомнение своё отцовство. У таких людей в роду просто есть человек без доминирующего белка D в эритроцитах, что и унаследовал малыш.

Группа крови для переливания

При осуществлении гемотрансфузии (переливании крови) важно соблюдать совместимость групп антигенов и резуса. Специалисты руководствуются правилом Оттенберга, которое гласит – кровяные тельца донора не должны склеиваться с плазмой реципиента. В малых дозах они растворяются в большом объёме биологического материала пациента и не выпадают в осадок. Такой принцип действует в случае переливания жизненно важной жидкости до 500 мл и не подходит, когда у человека сильная потеря крови.

Универсальными донорами считаются люди с нулевой группой. Их кровь подходит всем.

Представителям редкого 4 класса для гемотрансфузии подойдёт 1, 2 и 3 вид кровяной жидкости. Они считаются универсальными реципиентами (люди, которым вливают кровь).

Пациентам с 1 (0) положительной для переливания подойдёт 1 класс (Rh+/-), в то время, как человеку с отрицательным резусом можно вливать только нулевую с Rh-.

Людям, у которых 2 положительная, подходит 1 (+/-) и 2 (+/-). Пациентам с Rh- можно применять только 1 (-) и 2 (-). Аналогичная ситуация и с 3 классом. Если Rh+ – можно вливать 1 и 3 как положительную, так и отрицательную. В случае Rh-, подойдёт только 1 и 3 без анти-D.

Совместимость при зачатии

При планировании беременности, большое значение имеет сочетание резус-фактора мужчины и женщины. Это делается во избежание резус-конфликта. Такое бывает, когда у матери Rh-, а ребёнок унаследовал Rh+ от отца. При попадании доминирующего белка в кровь человека, где его нет, может возникнуть иммунологическая реакция и выработка агглютининов. Такое состояние провоцирует сцепление полученных эритроцитов и дальнейшее их разрушение.

Таблица совместимости крови для зачатия ребенка

Несовместимость резусов матери и ребёнка при первой беременности не несёт опасности, а вот перед вторым зачатием лучше разорвать выработку антирезусных тел. Женщине вводят специальный глобулин, который разрушает иммунологические цепочки. Если этого не сделать, резус-конфликт способен спровоцировать прерывание беременности.

Может ли меняться группа крови?

В медицинской практике есть случаи изменения групповой принадлежности при беременности или вследствие перенесённых тяжёлых заболеваний. Это объясняется тем, что при подобных состояниях возможно сильное увеличение выработки красных кровяных телец. При этом замедляется склеивание и разрушение эритроцитов. В анализе подобное явление отражается как изменение маркеров в составе плазмы. Со временем всё становится на свои места.

Класс крови, как и резус-фактор, у человека закладывается генетически ещё до рождения и не может меняться в течение всей жизни.

Диета по группе крови

Главный принцип питания по групповой принадлежности заключается в подборе продуктов, которые близки организму генетически и позволяют наладить работу пищеварительной системы, а также похудеть.

Первым, кто предложил учитывать группу крови при выборе пищи, стал американец Питер Д’Адамо. Врач натуропат издал несколько книг, в которых изложил свою идею здорового питания. Если правильно выбирать еду, можно забыть о плохом усвоении полезных веществ и проблемах с желудком, кишечником.

Таблица «Диета по группе крови»

Группа крови	Разрешённая еда	Пища, которую стоит максимально ограничить
1 (0)	Морская рыба Любое мясо (жареное, тушёное, варёное, маринованное и приготовленное на костре) Пищевые добавки (имбирь, гвоздика) Все виды овощей (за исключением картофеля) Фрукты (кроме цитрусовых, клубники) Сухофрукты, орехи Зелёный чай	Молоко и его производные Мучные продукты Пшеничная, кукурузная, овсяная каша, хлопья, отруби
2 (А)	Мясо индейки, курицы Куриные яйца Йогурт, кефир, ряженка Фрукты (кроме бананов) Овощи (особенно ценны кабачок, морковь, брокколи, шпинат) Орехи, семечки	Пшеничная и кукурузная каша Мучные изделия Баклажаны, помидоры, капуста, картофель Молоко, творог
3 (В)	Рыба жирных сортов Молоко и кисломолочные продукты Специи (перечная мята, имбирь петрушка)	Куриное мясо Гречневая каша Чечевица
4 (АВ)	Морская и речная рыба Соевые продукты Творог, йогурт, кефир Брокколи, морковь, шпинат Квашеные огурцы, помидоры Морская капуста	Курятина, красное мясо Свежее молоко Речная белая рыба Гречневая, кукурузная каша

Диета по групповой принадлежности подразумевает ограничение алкоголя, табакокурения. Немаловажным является активный образ жизни – бег, пешей ходьбой на свежем воздухе, плаваньем.

Особенности характера по группе крови

Группа крови влияет не только на физиологические особенности организма, но и на характер человека.

Нулевая группа

В мире около 37% носителей нулевой группы крови.

Главными особенностями их характера являются:

• стрессоустойчивость;
• лидерские задатки;
• целеустремленность;
• энергичность;
• смелость;
• амбициозность;
• коммуникабельность.

Обладатели нулевой группы предпочитают заниматься опасными видами спорта, любят путешествовать и не бояться неизвестности (легко берутся за любую работу, быстро обучаются).

К недостаткам можно отнести вспыльчивость и резкость. Такие люди часто бесцеремонно высказывают своё мнение и бывают высокомерными.

2 группа

Наиболее распространённой группой считается 2 (А). Её носители – это сдержанные люди, которые способны найти подход к самым сложным личностям. Они стараются избегать стрессовых ситуаций, всегда дружелюбны и трудолюбивы. Обладатели 2 группы очень хозяйственны, добросовестно выполняют свои обязанности и всегда готовы помочь.

Среди недостатков характера выделяют упрямство и неумение чередовать работу с отдыхом. Таких людей трудно растормошить на какие-то необдуманные поступки или неожиданные мероприятия.

3 группа

Человек, в крови которого преобладают антигены группы В, натура переменчива. Такие люди отличаются повышенной эмоциональностью, креативностью и независимостью от мнения окружающих. Они с лёгкостью пускаются в путешествия, берутся за новые дела. В дружбе – преданы, в любви – чувственны.

Среди негативных качеств часто проявляются:

• частая переменчивость в настроении;
• непостоянство в поступках;
• высокие требования к окружающим.

Обладатели 3 группы крови часто пытаются спрятаться от реалий мира в своих фантазиях, что не всегда является положительной чертой характера.

4 группа

Носители 4 группы обладают хорошими лидерскими качествами, что проявляется в умении вести переговоры и быть собранными в ответственный момент. Такие люди коммуникабельны, легко сходятся с окружающими, в меру эмоциональны, многогранны и умны.

Несмотря на множество достоинств в характере, представители 4 группы часто не могут прийти к единому решению, мучаются от двойственности чувств (внутренний конфликт) и отличаются тугодумством.

Специфический состав крови и наличие в ней или отсутствие доминирующего фактора (антигена D) передаётся человеку с генами. Существует 4 группы крови и резус-фактор. Благодаря классификации по системе АВ0 и Rh специалисты научились безопасно переливать донорскую кровь, определять отцовство и избегать резус-конфликта во время ребёнка. Проверить свою групповую принадлежность каждый человек может в лаборатории, сдав биологический материал из пальца или вены.

Группа крови – это оригинальные антигенные характеристики клеток крови (эритроцитов), которые определяются с использованием способов распознания групп белков и углеводов, содержащихся в оболочке эритроцитов. Определить группу крови – обязанность каждого человека, для этого необходимо сдать анализ. На сегодняшний день в любой больнице или поликлинике можно сдавать свою кровь на исследование, поэтому трудностей с проведением данной процедуры не возникает, и каждому важно знать, как определить группу крови и откуда берут материал на исследование.

Группа крови в течение всей жизни у каждого человека остается неизменной. Люди с одним типом могут отличаться от людей с другим по причине того, что у каждого человека разное количество агглютиногенов A и B в кровяных клетках, а также совсем разное количество агглютининов α и β, которые содержатся уже в амбоцептере крови.

В природе существует несколько видов групп крови:

• 0(I) – эта содержит только агглютинины α и β, агглютиногенов нет.
• A(II) – содержится только агглютинин β и агглютиноген A.
• В(III) – агглютинин α и агглютиноген B.
• AB(IV) группа крови - содержит агглютиногены A и B, агглютинины отсутствуют.

Откуда появилась классификация? Впервые открыл все существующие типы крови у людей врач из Австрии. Это открытие позволило ученому получить премию А.Нобеля по медицине в 1930 году. Также открытие групп помогло остановить смертельные исходы в процессе переливания крови от одного человека другому . Человек, которому необходимо сделать переливание называется реципиентом. Человек же, что сдает свою кровь, называется донором. Наиболее подходящим типом для реципиента будет кровь идентичная его типу.

Помимо существующих антиглютиногенов A и B в кровяных клетках можно наблюдать и другие антигены, например, резус-факторы. В ситуации, если кровь не совместима по резус-фактору, то проводить переливание категорически запрещено. Впоследствии могут возникнуть плачевные случаи, вплоть до летального исхода.

Проведение исследования

Как узнать группу крови, откуда ее берут для исследования? Эти вопросы интересуют всех заинтересованных людей. Для этого можно обратиться в лечебное учреждение, где нужно сдать биологическую жидкость из пальца. Анализ на группу крови можно проводить тремя основными способами:

• по изогемагглютиновым сывороткам;
• по изогемагглютиновым сывороткам и стандар­тным клеткам крови (перекрёстный способ);
• метод с применением МКА (цоликлоны анти-A и анти-B).

Обычно в лабораториях переливания крови проводят исследование по первому способу, т.е. с применением стандартных изогемагглютиновых сывороток. Процесс заключается в том, что тест проводится на обнаружение антиглютиногенов A и B в освещенной лаборатории с температурой воздуха в пределах 15-25 °C. Для этого берут исследуемый материал и на специально подготовленную тарелку или пластину наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворот­ки I, II, III групп в объеме 0,1 мл.

Чтобы избежать возникновения каких-либо неточностей, наносят две серии сывороток каждого из типов. Должно получиться 6 капель. Эти 6 ка­пелек образца анализируемой биожидкости переносят на специальную пластину в другие 6 точек, при этом каждую каплю размещают рядом с капельками сыворотки (крови понадобится в 10 раз меньше, чем используемое количество сыворотки), после этого их аккуратно смешивают уже другими палочками со слегка закругленными краями. Во время смешивания пластину аккуратно покачивают из стороны в сторону. Склеивание клеток происходит в течение 30 секунд. В те капли биологической жидкости, где прошло соединение, добавляется немного изотонного раствора хлорида натрия, и оценивается результат теста.

Вторым тестом на группу является перекрёстный метод. Его чаще применяют в серологических лабораториях. Перекрестный метод заключается в том, что сдавать биологический материал нужно на определение содержания антиглютиногенов A и B с применением стандартных изогемагглютиновых сывороток и антител α и β при помощи эритроцитов. Для этого на специальную тарелку белого цвета наносят маркером 6 клеток, в которые капают пипеткой по 1 капле сыворотки из анализируемой биожидкости, а рядом располагают по маленькой капле эритроцитов определенных групп 0(I), A(II), B(III) – по два раза.

Отличительной и главной особенностью этого метода является то, что эритроциты группы 0(I) главные, т.к. они не содержат антигенов. Эта особенность делает невозможным соединение эритроцитов с любой из сывороток.

В третьем тесте на выявление применяют МКА. Используется гибридомная биотехнология. Гибридома представляет собой гибрид клеток, полученных из миеломы и иммунного лимфоцита, что производит МКА. К моноклональным антителам (МКА) относят: цоликлоны анти-A и цоликлоны анти-B. Их наносят на приготовленную пластину белого цвета по 1 большой капле под специальными надписями анти-A и анти-B. После, рядом с каплями антител размещают по маленькой капле анализируемой биожидкости. Агглютинация происходит в последующие 2–3 минуты.

Погрешности при проведении исследования

Определение группы крови описанными тестами может осложниться появлением некоторых характерных ошибок. Все возможные ошибки можно классифицировать на три группы: технические, биологические и сывороточные.

К техническим ошибкам относятся поспешная оценка результатов, несоблюдение режима нужной температуры, отсутствие маркировки платин, неверное соотношение количества крови и сыворотки. Биологические ошибки появляются в тех случаях, когда красные кровяные тельца соединились со всеми сыворотками, на исследование берут инфицированную биожидкость, происходит полная панагглютинация, неактивные антигены A и B. Сывороточные ошибки могут быть, если берут инфицированную, просроченную или сыворотку с титром ниже 32.

Во избежание указанных погрешностей нужно соблюдать строгие правила при проведении тестов на установление своей группы . Следует использовать разные тарелки (чистые и сухие), категорически нельзя смешивать компоненты одной и той же палочкой, следить за сроками и температурой, ну и конечно, процедура определения группы крови не должна проходить в домашних условиях, а только в медицинском учреждении специалистами.

Таким образом, только исследования в лабораторных условиях помогут ответить на главный вопрос, как узнать группу крови. И никакая иная информация или советы других людей не позволят узнать свою группу, особенно в домашних условиях. Поэтому для тех, кто задается вопросом, какая у меня группа крови, для проведения правильного исследования с точными результатами необходимо специальное оборудованное помещение, где будут соблюдаться все требования, а не домашние условия с использованием подручных предметов.

Каждый человек - носитель генетически наследуемых характеристик, неизменных при естественных условиях, или определенного типа крови. Группа крови - отличительный признак белков, углеводов, гликопротеинов, гликолипидов, формирующихся на поверхности эритроцитов и носящих название «антиген». Составляя часть мембраны красных форменных элементов, антигены обнаруживают себя у всех представителей рода человеческого.

В медицине классифицируют множество разновидностей эритроцитарных групповых антигенов, то есть разные люди могут обладать одинаковым антигенным набором. Исходя из типологии антигенов, различают около трех десятков систем групп крови, таких как АВ0, MNS, Lutheran, Rh, Duffy, Colton и др.

Современная медицина пользуется двумя - АВ0 и Rh, играющими решающую роль при трансфузии. Подробнее рассмотрим в данной статье обозначенные системы группы крови «а-бэ-ноль» и «резус-фактор».

Система группы крови AB0

Открытию группы крови по системе АВ0 мы обязаны австрийскому иммунологу Карлу Ландштейнеру. Именно он сделал вывод, что одинаковая с виду кровь различается эритроцитарными свойствами. Жидкую подвижную соединительную ткань он распределил на три группы, обозначив их как A, B, 0. Позднее чешский врач Я. Янский открыл дополнительную группу AB и предложил обозначать типы крови с помощью цифр I, II, III, IV.

С этих пор трансфузия (переливание) считается эффективным терапевтическим методом, активно используемым при лечении многих болезней.

С 1928 году гигиенической Лигой Наций утверждено еще буквенное обозначение, по сей день принятое за основу классификации во всем мире: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).

Группы крови системы АВ0 позволили определить, почему переливание часто проходит с успехом, однако порой имеет летальный исход. Ландштейнер опытным путем доказал: при смешении эритроцитов одного пациента с плазмой другого, кровь свертывается, образуя хлопья. Эта способность плазмы (сыворотки) склеивать (агглютинировать) красные кровяные клетки получила название изогемагглютинация. Происходит эта реакция из-за присутствия в красных форменных элементах антигенов, именуемых агглютиногенами, которые обозначаются буквами A, B; а в сыворотке - природных антител (агглютининов), обозначаемых как a, b. Изогемагглютинация происходит только тогда, когда встречаются однобуквенные антигены и антитела, например, A-a, B-b.

Соответственно, в человеческой крови невозможно соединение одноименных агглютиногенов и агглютининов, поскольку способность агглютинировать эритроциты приведет к смерти.

Согласно теории Ландштейнера допускаются только четыре сочетания, исключающие встречу однобуквенных антигенов и антител, или 4 разновидности крови. Основанием данного разделения считается способность жидкой подвижной соединительной ткани содержать/не содержать антигены (агглютиногены) А, В и антитела (агглютинины) a (альфа или анти-А), b (бета или анти-Б).

Данная таблица отражает серологию по системе АВ0 группы крови:

Как видно из таблицы, в плазме имеются два вида гемолизинов, обозначаемых также буквами a, b. Соединение однобуквенных агглютиногенов и гемолизинов приводит к гемолизу (разрушению) эритроцитов. Данная реакция совершается при температуре 37-40°С, в то время при комнатном температурном режиме встреча одноименных антигенов и антител сопровождается агглютинацией без гемолиза.

Плазма обладателей II, III, IV типов содержит антиагглютиногены, оставившие красные кровяные тельца и ткани, отмечающиеся как агглютиногены – А, В.

Благодаря данной теории стала возможна трансфузия, протекающая без различного рода осложнений.

Существует общепринятое правило определения совместимости крови разных типов: плазма реципиента обязана принять донорские эритроциты. Поэтому у пациента, нуждающегося в переливании, важно учитывать значение агглютининов и гемолизинов, в то время как у отдающего кровь - агглютиногенов, присутствующих в красных форменных элементах.

Решая проблему сочетаемости группы крови по АВ0, необходимо смешать жидкую соединительную ткань с сывороткой, взятой у носителей разных типов крови. Агглютинация наблюдается при следующих сочетаниях:

Из этого следует, что по системе AB0 I группе свойственно абсолютное сочетание с остальными, ее носители признаны универсальными донорами. Соответственно, обладатели IV группы являются универсальными реципиентами, так как красные кровяные клетки данного типа не должны вызывать агглютинацию с плазмой носителей другого типа крови.

Поскольку при таком подходе могут возникнуть осложнения, в медицинской среде чаще всего пользуются другим методом: реципиенту переливается одногруппный материал донора при множественной кровопотере. Редко используют выше описанное правило смешивания групп.

Rh-система крови

Значимой системой крови после AB0 считается Rh (резус-фактор), открытая в 40-ые годы 20-го столетия К. Ландштейнером и К. Винером. Она представляет собой 50 антигенов, обнаруживаемых группой крови. Самыми важными признаны 6 (D, C, c, CW, E, e). Наиболее активным является D-антиген, определяющий принадлежность людей к резус-положительному (Rh+)/резус-отрицательному (Rh–) фактору. Наличие антигена говорит о Rh+ у 85% людей белой расы. У остальных 15% антиген (агглютинин) отсутствует, что свидетельствует о Rh–. В сравнении с системой AB0 у Rh отсутствуют необходимые агглютинины в плазме. Но при трансфузии материала Rh+ донора Rh– реципиенту обнаруживаются антитела - антирезус - агглютинины в крови испытуемого, которому переливали донорскую кровь. Повторение процедуры приводит к агглютинации эритроцитов, или гемотрансфузионному шоку.

Ученые пришли к выводу, что носителям Rh– можно переливать только Rh–.

Аналогичная ситуация может возникнуть у матери - обладательницы Rh– при вынашивании ребенка — носителя Rh+, когда резус-агглютиногены, оказываясь в ее организме, активно вырабатывают антитела. Как правило, первая беременность протекает успешно и заканчивается благополучным родоразрешением. По статистике при последующих вынашиваниях Rh+ плода антитела, проникая через плаценту, поражают красные кровяные клетки плода, приводя к выкидышу или гемолитической анемии новорожденных. Поэтому в качестве иммунопрофилактических мер женщинам с Rh– после первых родов вводят концентрат анти-D-антитела.

Тестирование на группу крови и резус-фактор

Знание группы крови, резус-фактора очень важно для спасения жизни в ситуациях, чаще всего связанных с большой кровопотерей или других патологических случаях, когда трансфузия является одним из основных терапевтических методов.

Результаты исследования покажут принадлежность крови человека к одной из групп системы «а-бэ-ноль», исходя из наличия антигенов на красных кровяных тельцах и антител.

Определение принадлежности к группе крови по системе АВ0 происходит по активным стандартным плазмам каждой из групп с титром 1:32 и красным форменным элементам, соответствующим стандарту. Иногда дополнительно используют плазму IV группы. Данные материалы смешивают с кровью пациента, затем следят за реакцией в течение 3 мин. К смеси плазмы с кровью с наступившим склеиванием капают 0,9% раствор хлорида натрия и ждут до 5 минут. Затем считывают агглютинацию через проходящий свет, на основании чего делают вывод о групповой принадлежности:

• отсутствие агглютинации во всех пробах отрицает агглютиноген, говоря об отношении к 0(I);
• агглютинация в плазме с пробами 0(I), В(III) указывает на агглютиноген А и А(II);
• наличие процесса склеивания красных форменных элементов в сыворотке 0(I), А(II) говорит о присутствии агглютиногена В и отношении к В(III);
• протекание агглютинации во всех исследуемых материалах показывает присутствие агглютиногенов А, В и принадлежность к АВ(IV).

В последнем случае возможна неспецифическая реакция. Для подтверждения данных смешивают стандартную сыворотку АВ(IV), кровь испытуемого и ведут наблюдение в течение 5 мин. Если склеивание эритроцитов не происходит, она имеет отношение к группе АВ(IV).

При слабо выраженной агглютинации или в случае сомнения пробу повторяют вновь.

Для тестирования резус-фактора применяют стандартный реагент с антителами к резус-антигенам, смешивая его с кровью испытуемого. После добавления через 3-5 минут физраствора перемешивают содержимое и визуально на проходящий свет определяют наличие склеивания эритроцитов и выпадения осадка. При обнаружении хлопьев красного цвета делают вывод об отношении к Rh+. Отсутствие агглютинации свидетельствует о Rh–.

Группа крови по системе АВ0 и Rh принято указывать на одной строке, например, 0 (I)Rh+, 0 (I)Rh- и т.д.

Сдать анализ крови на групповую принадлежность и резус-фактор можно в любой клинической лаборатории. Кроме этих значений в анализе указывают совместимость, определяя материал какой группы, резус-фактора можно переливать при острой необходимости.

Наследование групп крови

Доказано, что группа крови ребенка наследуется от родителей. Существует несколько очевидных закономерностей в наследовании групповой принадлежности:

1. В семье, где один из родителей имеет 0(I), не может родиться малыш с IV(AB) группой. При этом группа второго родителя не имеет значения.
2. Мама и папа - носители 1 группы крови, значит дети родятся с аналогичной группой.
3. У родителей со 2 группой рождаются младенцы только с 1 или 2 группами.
4. Если оба супруга имеют 3 группу, то дети - носители только 1 или 3.
5. При наличии у одного из родителей типа IV(AB) не может родиться ребенок с 1 группой независимо от группы крови другого родителя.
6. При сочетании 2 и 3 групп у супругов дети могут иметь любой из возможных типов крови.

Зафиксировано, что в 1 случае на десять миллионов может произойти наследственная мутация, именуемая бомбейский феномен. Его суть в том, что дети при рождении имеют группу, которая не содержит антигены А и B, а также компонент Н. Такие люди живут обычной жизнью, сложности могут возникнуть лишь при трансфузии или установлении отцовства.

Знать свою группу крови, резус-фактор, а также совместимость с другими группами должен каждый человек. Иногда это становится решающим фактором, от которого зависит жизнь.

Вконтакте

Показания: необходимость переливания крови, подготовка к оперативному вмешательств.

Приготовить: стандартную тарелочку с углублениями;набор стеклянных палочек;изотонический раствор хлорида натрия;набор гемагглютинирующих сывороток 1,2,3,4 групп двух серий;пипетки;исследуемую взятую из вены или пальца кровь; часы; лотки;перчатки; емкости для отработанного материала; контейнеры с дезинфицирующими растворами.

Подготовка к манипуляции:

1. Медицинская сестра полностью подготовлена к выполнению манипуляции: одета в костюм (халат), маску, перчатки, колпак, сменную обувь.
2. Проверить качество стандартных гемагглютинирующих сывороток по: цветовой маркировке, внешнему виду (светлая, прозрачная); сохранность упаковки, наличию правильно оформленной этикетки.
3. Подготовить все необходимое для выполнения манипуляции.

Выполнение манипуляции:

на белую тарелочку, согласно обозначению, последовательно нанести по одной капле сыворотки 1, 2, 3 групп двух серий. Каждую пипетку немедленно опускать в ту же ампулу (флакон) из которых они были взяты;

с помощью стеклянной палочки нанести рядом с углублениями (6 углублений) по капле исследуемой крови. Капля крови должна быть в 10 раз меньше капли сыворотки;

отметить время и чистой, сухой стеклянной палочкой перемешать кровь с сывороткой 1 гр., затем другой палочкой 2 гр. и т.д. во всех углублениях;

по мере наступления агглютинации, но не ранее 3 минуты, в те капли, в которых наступила реакция агглютинации добавить по одной капле изотонического раствора хлорида натрия для исключения ложной агглютинации и продолжать наблюдение в течение 5 минут.

Оценка результатов:

а) при положительной реакции в смеси появляются видимые глазом мельчайшие зернышки, состоящие из склеившихся эритроцитов. Мелкие зерна сливаются в крупные зерна, а иногда в хлопья, сыворотка при этом – обесцвечивается;

б) при отрицательной реакции жидкость остается равномерно окрашенной в розовый цвет;

в) возможны 4 комбинации положительной и отрицательной реакции:

1. если агглютинации нет ни в одной из ячеек, то кровь I (0) группы.

2. если агглютинация в первой и третей ячейках, то кровь II (А) группы.

3. если агглютинация в первой и второй группах, то кровь III (В) группы.

4. если агглютинация в первой, второй, третей ячейках, то кровь IV (АВ) группы.

Для исключения ошибки проверяют кровь с сывороткой 4 группы, где агглютинации не должно быть.

Окончание манипуляции:

1. Снять перчатки, поместить их в дезинфицирующий раствор.
2. Вымыть руки, осушить полотенцем.

Примечание: определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15 – 25 0С.

Определение группы крови в системе АВО

Для предотвращения осложнений при переливании крови вследствие реакции агглютинации необходимо предварительно определять группу крови человека.

Цель работы: определить группы крови в системе АВО (с помощью цоликлонов).

Оснащение: цоликлоны, стерильный скарификатор, две стеклянные палочки, стандартные сыворотки групп I, II, III; кафельная белая плитка, вата, спирт, йод, эфир. Объект исследования - человек.

Проведение работы. Группы крови определяют по свойствам эритроцитов, которые устанавливают с помощью стандартных сывороток, содержащих известные агглютинины (антитела).

На кафельную плитку наносят, не смешивая, по одной капле стандартных сывороток I, II и III групп, содержащих соответственно следующие агглютинины: I-α и β, II-β и III - α. Затем, получив каплю крови из пальца, первой стеклянной палочкой переносят небольшое количество её в каплю сыворотки I группы, вторым чистым концом этой же палочки такое же количество крови переносят в сыворотку II группы. При помощи второй стеклянной палочки третью каплю исследуемой крови переносят в сыворотку III группы. Каждый раз кровь тщательно размешивают в капле сыворотки, пока смесь не станет равномерно розоватого цвета. Реакция агглютинации наступает через 1-5 мин. При наличии агглютинации капля утрачивает гомогенность и становится прозрачной, а эритроциты склеиваются в виде комочков. Группу крови устанавливают в зависимости от наличия или отсутствия агглютинации.

1. Если агглютинации нет во всех трёх каплях, это свидетельствует об отсутствии агглютиногенов в эритроцитах исследуемой крови и, следовательно, она принадлежит I (0) группе.

2. Если агглютинация произошла с сыворотками I и III групп, содержащими соответственно агглютинины α + β и α, то эритроциты исследуемой крови содержат агглютиноген А и эта кровь принадлежит II (А) группе.

3. Если агглютинация произошла с сыворотками I и II групп, содержащими агглютинины α + β и β, то эритроциты исследуемой крови содержат агглютиноген В и она принадлежит III (В) группе.

4. Если агглютинация произошла с сыворотками I, II и III групп, содержащими соответственно α + β, β и α агглютинины, то эритроциты исследуемой крови содержат как агглютиноген А, так и агглютиноген В. Следовательно, исследуемая кровь принадлежит IV (АВ) группе.

В последнее время определение групп крови человека системы АВО проводят с помощью цоликлонов Анти-А и Анти-В (антитела моноклональные Анти-А и Анти-В), которые применяют или взамен или параллельно с поликлональными иммунными сыворотками. Моноклональные Анти-А и Анти-В антитела продуцируются двумя мышиными гибридомами и принадлежат к иммуноглобулинам класса М. Цоликлоны изготавливаются из асцитной жидкости мышей-носителей анти-А и анти-В гибридом. Технология изготовления реагента исключает возможность его контаминации патогенными для человека вирусами.

Таблица 1. Оценка результатов определения групп крови с применением цоликлонов

Проведение работы. Нанесите на пластину индивидуальными пипетками цоликлоны Анти-А и Анти-В по одной большой капле. Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови. Наблюдайте за ходом реакции с цоликлонами визуально при лёгком покачивании пластины в течение 3 минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3-5 сек, но наблюдение следует вести 3 мин ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В. Положительный результат выражается в агглютинации эритроцитов. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет.

Знаком плюс (+) обозначено наличие агглютинации, знаком минус (-) - отсутствие агглютинации.

Оформление протокола. Запишите, к какой группе крови принадлежит ваша кровь. Определите: реципиентам с какими группами крови можно переливать вашу кровь и кровь какой группы можно переливать вам?

Ситуационные задачи для определения конечного уровня знаний студентов:

Задача№1

При длительном голодании у людей появляются так называемые голодные отёки. В чём причина?

Задача №2

Человек съел недоброкачественную пищу. Через некоторое время у него обнаруживается повышение вязкости в крови. Чем можно объяснить это?

Задача№3

При исследовании крови обнаружено, что 80% гемоглобина составляет фетальный гемоглобин. Кому принадлежит кровь?

Задача №4

При подсчёте в больших квадратах камеры Горяева оказалось 580 эритроцитов. Сколько их содержится в 1мл крови, если кровь в меланжер набиралась до метки 0,5?

Задача №5

В 25 больших квадратах камеры Горяева оказалось 100 лейкоцитов. Сколько их содержится в 1мм3 крови, если она набиралась в меланжер до метки 0,5?

Задача №6

В 1мм3 крови содержится 6млн. эритроцитов. Сколько всего их в циркулирующей крови, если 20% всей крови находится в кровяном депо? Вес тела принять за 80кг.

Задача №7

В результате переливания несовместимой группы крови произойдет склеивание эритроцитов, что в дальнейшем приведет к гемолизу. Назовите вид гемолиза?

Задача №8

Почему женщинам запрещено работать на производстве с высоким уровнем вибрации, водить большегрузные машины и т.д.?

Задача №9

В чём причина увеличения билирубина в крови при отравлении уксусной кислотой?

Задача №10

Кровь отца резус-положительная, матери резус-отрицательная, первая беременность. Существует ли опасность резус-конфликта матери и плода, если плод имеет резус-положительную кровь?

Задача №11

Отец имеет резус-отрицательную кровь, мать – резус-положительную. У плода резус-фактора нет. Существует ли опасность резус-конфликта между плодом и матерью?

Задача №12

Почему при остром психическом стрессе может произойти инфаркт миокарда?

Задача №13

Свёртывание крови представляет собой сложный многокомпонентный «каскадный» ферментативный процесс. Нормальное протекание каждой предшествующей фазы обеспечивает развитие и завершение каждой последующей. Что происходит в первую, вторую и третью фазы коагуляционного гемостаза? Что включает послефаза гемокоагуляции?

Задача №14

Для нормального протекания свёртывания крови необходим ряд факторов: протромбин, тромбопластин, АС – глобулин, ионизированный кальций, проконвертин и др. Назовите фактор, участие которого необходимо для протекания всех фаз гемокоагуляции. Какой фактор обеспечивает превращение растворимого фибрин – полимера в нерастворимый фибрин? Где образуется протромбин? Какие факторы принимают участие в образование плазменной и тканевой протромбиназ?

23. Определение группы крови.

19.Классификация хронической ишемии по Фонтейну-Леришу-Покровскому

Классификация Фонтейна-Лериша-Покровского основана на выделении в развитии хронической артериальной недостаточности (ХАН) или недостаточности артериального кровообращения нижних конечностей нескольких стадий: Стадия I - бессимптомное атеросклеро-тическое поражение артерий, выявляемое только при инструментальном исследовании. Стадия II - артериальная недостаточ ность, возникающая при функциональной нагрузке (ПХ). Стадия IIА - ПХ на большой дистанции (> 200 м). Стадия НБ - ПХ на малой дистанции (< 200 м). Стадия III - артериальная недостаточность в покое (ишемия покоя). Стадия IV - трофические нарушения, некроз тканей. Важную роль сыграло выделение такого понятия, как критическая ишемия конечности (КИК), которое объединяет больных сХАНШиГУстадий [Дедов И. И. и др., 1998]. Смысл выделения этой группы больных заключается в том, что без своевременного восстановления кровотока ишемия практически неизбежно приведет у них к обширному некрозу тканей и ампутации. Согласно определению КИК от 1997 г., этот диагноз ставят при наличии одного из проявлений: 1. Ишемическая боль покоя в сочетании с АД < 40 мм рт. ст. на тибиальной артерии в положении лежа, на артерии большого пальца стопы - менее 30 мм рт. ст., отсутствием пульсовой волны или ее сглаженность при УЗДГ. 2. Некроз тканей (язва или гангрена) на фоне диффузной ишемии стопы в сочетании с АД < 60 мм рт. ст. на тибиаль ной артерии в положении лежа, на артерии большого пальца стопы - менее 40 мм рт. ст3., отсутствием пульсовой волны или ее сглаженностью при УЗДГ.

22.Трансплантация - операция по замещению органа или тканей пациента соответствующими структурами, удалёнными из другого организма.

Трансплантация состоит из двух этапов: забора органа из организма донора и имплантации его в организм реципиента. Трансплантация органов и (или) тканей может быть осуществлена только в том случае, когда другие медицинские средства не могут гарантировать сохранения жизни реципиента или восстановления его здоровья. Объектами трансплантации могут быть сердце, почки, лёгкое, печень, костный мозг и другие органы; их перечень утверждён Министерством здравоохранения. При трансплантации органов оптимально совпадение группы крови донора и реципиента по системе АВ0. Допустимо также несовпадение по системе АВ0, но по следующим правилам (напоминают правило Оттенберга при гемотрансфузии):

Если у реципиента группа крови 0(I), возможна пересадка только от донора с группой 0(I);

Если у реципиента группа крови A(II), возможна пересадка только от донора с группой A(II);

Если у реципиента группа крови В(III), возможна пересадка от донора с группой 0(I) и В(Ш);

Если у реципиента группа крови АВ(IV), возможна пересадка от донора с группой A(II), В(III) и AB(IV).

Совместимость по резус-фактору между донором и реципиентом учитывают индивидуально для трансплантации сердца и комплекса «сердце-лёгкие» при проведении искусственного кровообращения и использовании гемотрансфузии.

Основы иммуносупрессии

Для снижения активности иммунной системы и профилактики отторжения органов после операций трансплантации всем больным проводят фармакологическую иммуносупрессию. При неосложнён- ном течении используют относительно небольшие дозы препаратов по специальным схемам. При развитии криза отторжения дозы иммунодепрессантов значительно увеличивают, изменяют их комбинацию. Следует помнить о том, что иммунодепрессия приводит к значительному увеличению риска инфекционных послеоперационных осложнений. Поэтому в отделениях трансплантации особенно тщательно нужно соблюдать меры асептики.

Для иммуносупрессии в основном используют следующие препараты.

Циклоспорин - циклический полипептидный антибиотик грибкового происхождения. Подавляет транскрипцию гена интерлейкина-2, необходимого для пролиферации Т-лимфоцитов, и блокирует Т-интерферон. В целом иммунодепрессивное действие избирательное. Применение циклоспорина обеспечивает хорошую приживляемость трансплантата при относительно низкой вероятности инфекционных осложнений.

Отрицательный эффект применения препарата - нефротоксичность, но его положительные свойства позволяют применять циклоспорин в качестве основного иммунодепрессанта и при трансплантации почки.

Сиролимус - макролидный антибиотик, структурно родствен так- ролимусу. Подавляет регуляторную киназу («мишень сиролимуса») и уменьшает клеточную пролиферацию в цикле деления клеток. Действует на гемопоэтические и негемопоэтические клетки. Применяют в базовой иммуносупрессии в качестве основного или дополнительного компонента. Нет необходимости постоянного контроля концентрации препарата в крови. Возможные осложнения применения пре- парата: гиперлипидемия, тромботическая микроангиопатия, анемия, лейкопения, тромбоцитопения.

Азатиоприн. В печени превращается в меркаптопурин, подавляющий синтез нуклеиновых кислот и деление клеток. Применяют в сочетании с другими препаратами для лечения кризов отторжения. Возможно развитие лейко- и тромбоцитопении.

Преднизолон. Стероидный гормон, оказывающий мощное неспе- цифическое депрессивное действие на клеточный и гуморальный иммунитет. В чистом виде не используют, входит в состав схем иммунодепрессии. В высоких дозах применяют при кризах отторжения.

Ортоклон. Содержит антитела к CD3+-лимфоцитам. Применяют для лечения кризов отторжения в комплексе с другими препаратами.

Антилимфоцитарный глобулин и антилимфоцитарные сыворотки. Были введены в клиническую практику в 1967 г. для профилактики отторжения у больных с аллотрансплантацией почки. В настоящее время широко используют для профилактики и лечения отторжения, особенно у пациентов со стероид-резистентным отторжением. Оказывают иммунодепрессивное действие за счёт угнетения Т-лимфоцитов.

Кроме перечисленных препаратов, используют и другие средства: ингибиторы кальциневрина, моноклональные и поликлональные антитела, гуманизированные анти-ТАС антитела и пр.

Гистосовместимость - совместимость органов и тканей, например при трансплантации совместимая ткань не отторгается организмом реципиента. Определяется специфическими антигенными комплексами HLA системы расположенных на мембране клеток.

Гистосовместимость играет ключевую роль в успешности трансплантации органов и тканей. В норме организм противится введению в себя чужеродного белка, отвечая на него иммунной агрессией. Для осуществления успешной пересадки органа необходимо максимально точное совпадение донора и реципиента по антигенной структуре рецепторов. В зависимости от органа производится проверка разных антигенов для выявления совместимости.

Простейшим примером определения гистосовместимости является определение групп крови и резус-фактора перед переливанием. Чем больше специфических антигенов имеется в пересаживаемом органе или ткани, тем более трудным является подбор подходящего донора.

Совместимость по системе HLA

Совместимость по антигенам HLA считают определяющей при подборе донора. Комплекс генов, контролирующих синтез основных антигенов гистосовместимости, расположен в VI хромосоме. Полиморфизм антигенов HLA весьма широк. В трансплантологии основное значение имеют локусы А, В и DR.

В настоящее время идентифицировано 24 аллеля локуса HLA-A, 52 аллеля локуса HLA-B и 20 аллелей локуса HLA-DR. Комбинации генов могут быть крайне разнообразными, и совпадение одновременно во всех трёх указанных локусах практически невозможно.

После определения генотипа (типирования) производят соответствующую запись, например «HLA-A 5 (антиген кодируется 5 сублокусом локуса А VI хромосомы), А 10 , В 12 , В 35 , DR w6 » и т.д.

Отторжение в раннем послеоперационном периоде обычно связано с несовместимостью по HLA-DR, а в отдалённые сроки - по HLA-A и HLA-B. При полном совпадении HLA-A и HLA-B вероятность приживления донорской почки, например, в течение 2 лет составляет около 90%, при совпадении наполовину - 65-85%.

.Стадии заживления раны.

Проходит раневой процесс в определенной последовательности и имеет три фазы:

I фаза - фаза воспаления (1-5-й день);

II фаза - фаза регенерации (6-14-й день);

III фаза - фаза рубцевания и эпителизации (от 15 суток до 6 месяцев).

Фаза воспаления имеет два периода: сосудистых изменений и очищения раны от некротических тканей.

Период сосудистых изменений - в результате повреждения сосудов и сложных биохимических процессов в зоне повреждения нарушается микроциркуляция, происходит экссудация плазмы, лимфы, из сосудистого русла выходят форменные элементы (лейкоциты, лимфоциты, макрофаги). Развивается отек, происходит лейкоцитарная инфильтрация тканей, т. е. создаются условия для очищения раны.

Период очищения раны от некротических тканей - некролиз. В тканях, окружающих рану, появляются форменные элементы, которые фагоцитируют некротические массы, выделяют протеолитические ферменты и удаляют токсины, продукты белкового распада и микробов из раны с воспалительным экссудатом. В результате рана очищается от некротических тканей, купируются симптомы воспаления и наступает следующая фаза раневого процесса.

Фаза регенерации начинается с 6-го дня после травмы и характеризуется развитием восстановительных регенеративных процессов. В ране происходит интенсивный рост новых кровеносных и лимфатических сосудов, улучшается кровообращение, уменьшается гипоксия, и постепенно, к 14-му дню, стихает воспалительная реакция. В ране образуются новые сосуды, созревает грануляционная ткань, которая способствует ликвидации дефекта тканей.

Определение группы крови по системе АВ0 (стандартная методика) .

1. Исследование проводится при помощи двух серий стандартных гемагглютинирующих сывороток (I сыворотка – этикетка бесцветная, II – синяя, III – красная, IV – ярко-желтая) на подписанной (фамилия больного) фарфоровой пластинке или тарелке.

2. Соотношение объема исследованной крови и сыворотки должно быть 1:10.

3. Исследование можно производить при температуре воздуха от 15 до 250С.

4. Пластинку осторожно покачивают. По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 мин, в капли добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия. Результат читают через 5 мин:

1) I группа крови - агглютинации нет ни в одной капле;

2) II группа - стандартные сыворотки I и III групп агглютинируют эритроциты, а с сывороткой II группы агглютинация не наступает;

3) III группа - стандартные сыворотки I и II групп дают положительную реакцию, а сыворотка III группы - отрицательную;

4) IV группа - стандартные сыворотки всех трех групп вызывают агглютинацию. Однако для окончательного заключения необходимо провести контрольное исследование на специфичность реакции со стандартной гемагглютинирующей сывороткой IV группы.

Определение группы крови по системе АВО (экспресс-методика).

1. Исследование проводят двумя моноклональными сыворотками: анти-А (розового цвета) и анти-В (бирюзового цвета).

2. Реакция проводится на фарфоровой пластинке при обычном температурном режиме.

3. Наблюдают при покачивании в течение 3 мин.

Результат читается следующим образом:

1) с сывороткой анти-А агглютинации нет, а с анти-В есть - исследуемая кровь В (III);

2) в капле с сывороткой анти-А наступила агглютинация, с анти-В нет - исследуемая кровь А (II);

3) агглютинация наступила с обеими сыворотками - исследуемая кровь АВ (IV);

4) агглютинация не наступила в обеих каплях - кровь 0 (I);

Гемотрансфузионные осложнения характеризуются более тяжелыми клиническими симптомами и могут привести к смерти больного. Самой частой причиной осложнений является переливание, несовместимой крови (иногруппной или резуснесовместимой). Реже осложнения наблюдаются от переливания недоброкачественной крови (перегретой, загрязненной бактериями, неправильно хранившейся и т. п.), от погрешностей в технике (введение воздуха, сгустков крови в кровяное русло и т. д.), при пренебрежении противопоказаниями к переливанию крови.

Осложнения выражаются в виде острой сердечной недостаточности, отека легких, мозга. Время развития трансфузионных осложнений различно и зависит во многом от их причин. Так, при воздушной эмболии катастрофа может наступить немедленно после проникновения воздуха в кровяное русло. Наоборот, осложнения, связанные с сердечной недостаточностью, развиваются в конце или вскоре после переливания больших доз крови, плазмы. Осложнения при переливании несовместимой крови развиваются быстро, часто уже после введения небольших количеств такой крови, реже катастрофа наступает в ближайшее время по окончании переливания. Течение посттрансфузионных осложнений может быть подразделено на 4 периода: 1) гемотрансфузионный шок; 2) олиго-анурия; 3) восстановление диуреза; 4) выздоровление (В. А. Аграненко). Картина гемотрансфузионного шока (I период) характеризуется падением артериального давления, тахикардией, резким нарушением дыхания, анурией, повышенной кровоточивостью, что может привести к развитию кровотечения, особенно если несовместимое переливание крови производилось во время операции или в ближайшие часы после нее. При отсутствии рациональной терапии гемотрансфузионный шок может привести к смерти. Во II периоде состояние больного остается тяжелым из-за прогрессирующего нарушения функции почек, электролитного и водного обмена, нарастания азотемии и усиления интоксикации, что часто приводит к смерти. Длительность этого периода обычно от 2 до 3 недель и зависит от тяжести поражения почек. Менее опасен III период, когда восстанавливается функция почек, нормализуется диурез. В IV периоде (выздоровления) длительно держится анемизация. В I периоде трансфузионных осложнений необходимо бороться с тяжелыми гемодинамическими нарушениями и предупреждать отрицательное воздействие токсических факторов на функции жизненно важных органов, в первую очередь почки, печень, сердце. Здесь оправданы массивные обменные П. к. в дозе до 2-3 л с использованием одногруппной резус-совместимой крови малых сроков хранения, полиглюкина, сердечно-сосудистых средств. Во II периоде (олигурии, анурии, азотемии) терапия должна быть направлена на нормализацию водного, электролитного обмена и борьбу с интоксикацией и нарушением функции почек. Больному устанавливают строгий водный режим. Прием жидкостей ограничивают до 600 мл в сутки с добавлением такого количества жидкости, которое больной выделил в виде рвотных масс и мочи. В качестве трансфузионной жидкости показаны гипертонические растворы глюкозы (10-20% и даже 40%). Не менее 2 раз в сутки назначают промывания желудка и сифонные клизмы. При нарастании азотемии и усилении интоксикации показаны обменные переливания крови, внутрибрюшной и внутрикишечный диализ и особенно гемодиализ с применением аппарата «искусственная почка». В III и особенно в IV периодах проводят симптоматическую терапию.

У некоторых больных вскоре после переливания крови могут развиваться посттрансфузионные реакции, которые, в отличие от осложнений, не сопровождаются длительными нарушениями функций органов и систем и не представляют опасности для жизни. Наиболее типичными клиническими симптомами таких реакций являются общее недомогание, озноб, повышение температуры, боли в пояснице, тошнота, рвота, головная боль, аллергическая сыпь типа крапивницы, зуд кожи, отек век и т. д. Как правило, реакция начинается спустя 20 - 30 мин после гемотрансфузии, иногда во время нее и продолжается от нескольких минут до нескольких часов. В зависимости от тяжести клинического течения различают три степени посттрансфузионных реакций: легкую, среднюю и тяжелую. Легкая реакция характеризуется повышением температуры тела до 1° от исходной, общим недомоганием, познабливанием, головной болью и болями в мышцах конечностей. Перечисленные явления кратковременны, и специальных лечебных мероприятий для их устранения не требуется. Посттрансфузионные реакции средней тяжести сопровождаются повышением температуры тела до 1,5 - 2° от исходной, нарастающим ознобом, учащением пульса и дыхания. В ряде случаев может появляться крапивница. Нередко обостряются боли, обусловленные основным заболеванием. Тяжелые посттрансфузионные реакции характеризуются повышением температуры более чем на 2° от исходной, причем наблюдается потрясающий озноб, цианоз губ, сильная головная боль, рвота, боль в поясницей костях, одышка, крапивница, отеки типа Квике, лейкоцитоз. Больные, у которых развились посттрансфузионные реакции или имеется основание предполагать их появление, требуют обязательного врачебного наблюдения и при необходимости своевременного лечения. В зависимости от причины появления и клинического течения различают реакции пирогенные, аллергические и анафилактические. Пирогенные реакции обусловлены внесением пирогенов в кровь реципиента во время гемотрансфузии. Образование пирогенов может происходить в консервированной крови или в недостаточно тщательно подготовленных системах для переливания. Пирогенные посттрансфузионные реакции проявляются в основном общим недомоганием, лихорадкой и ознобом. В зависимости от тяжести они также могут быть легкие, средние и тяжелые.

Пробы на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента

4.1. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином

4.2. Проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре

4.3. Непрямая проба Кумбса

4.4. Проба на совместимость с применением 10% желатина

4.5. Проба на совместимость с применением 33% полиглюкина

Проба на индивидуальную совместимость позволяет убедиться в том, что у реципиента нет антител, направленных против эритроцитов донора и таким образом предотвратить трансфузию эритроцитов, несовместимых с кровью больного.

Проба на совместимость, выполняемая на плоскости при комнатной температуре, имеет целью выявить у реципиента полные групповые агглютинины системы АВ0, MNSs, Lewis и др. Проба на совместимость с применением 10% желатина, 33% полиглюкина, непрямая проба Кумбса предназначена для выявления у реципиента неполных групповых антител. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином предусматривает выявление и тех и других антител, в том числе групповых гемолизинов.

Наиболее чувствительной и рекомендуемой является двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином, затем комбинация двух проб - пробы на плоскости при комнатной температуре и непрямой пробы Кумбса. Вместо непрямой пробы Кумбса может быть применена реакция конглютинации с 10% желатином или реакция конглютинации с 33% полиглюкином. Последняя проба уступает по чувствительности первым двум, однако занимает меньше времени.

Определение групповой принадлежности крови (система АВ0)

Материальное оснащение: гемагглютинирующие сыворотки групп 0ab (I), Аb (II), Вa (III) двух различных серий, сыворотка группы АВ0 (IV), изотонический раствор NaCl, пипетки, предметные стекла или стеклянные палочки, планшет для определения групп крови, донорская кровь, игла-скарификатор одноразового пользования, спирт, вата.

Техника определения групп крови при помощи стандартных гемагглютинирующих сывороток

В верхней части планшета надписывают фамилию и инициалы лица (испытуемого или донора), у которого определяют групповую принадлежность крови. На смачиваемую белую поверхность планшета, в ячейки, надписанные обозначениями: слева - 0ab (I), в середине - Аb (II), справа - Вa (III), пипеткой наносят по одной большой капле (0,1 мл) стандартной сыворотки I, II, III групп, содержащей соответственно агглютинины I - a и b; II - b и III - a. Так как используют стандартные сыворотки двух различных серий каждой группы, то всего получается 6 капель, которые образуют два ряда по три капли в следующем порядке слева направо: 0ab (I), Аb (II) и Вa (III). Сухой стеклянной палочкой или краем предметного стекла по одной маленькой капле (0,01 мл), приблизительно в 10-20 раз меньше капли сыворотки, исследуемую кровь, взятую из пальца (или донорскую кровь) переносят в ячейки рядом с каплей стандартной сыворотки. Соотношение должно быть 1: 10, т.е. 1 часть крови, 10 частей сыворотки.

Другой стеклянной палочкой (или другим краем предметного стекла) перемешивают каплю крови с сывороткой группы 0ab (I) до тех пор, пока смесь не окрасится в равномерно розовый цвет. Следующей стеклянной палочкой (другим углом стекла) перемешивают следующую каплю крови с сывороткой группы Аb (II) и также поступают с сывороткой группы и Вa (III). Так же смешивают кровь с сыворотками во втором ряду.

После размешивания капель планшет покачивают, затем на 1 минуту оставляют в покое и снова периодически покачивают. Наблюдение за ходом реакции производят при легком покачивании планшета в течение 5 минут. Агглютинация наступает обычно в течение первых 19-30 секунд, однако наблюдение производят не менее 5 минут ввиду возможности позднего наступления агглютинации в случае слабой агглютинабельности эритроцитов (А 2 или А 2 В).

Результат реакции в каждой капле может быть положительным (+) или отрицательным (-).

Положительный результат (+) выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов; агглютинаты видны невооруженным глазом сначала в виде мелких красных зернышек, постепенно сливающихся в более крупные хлопья. При этом сыворотка постепенно обесцвечивается. По мере наступления агглютинации, но не ранее 3 минут, в эти капли добавляют по одной большой капле (0,1 мл) физиологического раствора NaCl для разрушения иногда наступающей ложной агглютинации - неспецифического склеивания эритроцитов в так называемые монетные столбики. Планшет покачивают и продолжают исследование до истечения 5 минут.

В тех случаях, когда положительный результат получается со стандартными сыворотками всех трех групп (во всех каплях), для исключения неспецифической агглютинации проводится дополнительное исследование испытуемых эритроцитов со стандартной сывороткой группы АВ 0 (IV), не содержащей групповых агглютининов. Для этого на поверхность 7-й ячейки наносят одну большую каплю (0,1 мл) сыворотки группы АВ 0 (IV) и рядом - маленькую каплю (0,01 мл) крови. Кровь смешивают с сывороткой и при покачивании планшета исследуют реакцию в течение 5 минут. Лишь отсутствие агглютинации с сывороткой группы АВ 0 (IV) позволяет учесть положительный результат реакции с сыворотками 0ab (I), Аb (II) и Вa (III) как истинный.

Группу крови устанавливают в зависимости от наличия или отсутствия реакции изогемагглютинации. Оценку результата см. на рисунке 1.

Результаты реакций в каплях с сыворотками могут дать четыре различных комбинации положительных и отрицательных реакций.

1. Если сыворотки всех трех групп дали отрицательную реакцию, т.е. все смеси остались равномерно окрашенными в розовый цвет без признаков агглютинации, то испытуемая кровь не содержит агглютиногенов и, следовательно, принадлежит к группе 0ab (I).

2. Если сыворотки групп 0ab (I) и Вa (III) дали положительную реакцию, а сыворотка группы Аb (II) - отрицательную, то испытуемая кровь содержит агглютиноген А и эта кровь принадлежит к группе Аb (II).

3. Если сыворотки групп 0ab (I) и Аb (II) дали положительную реакцию, а сыворотка группы Вa (III) - отрицательную, то испытуемая кровь содержит агглютиноген В, т.е. принадлежит к группе Вa (III).

4. Если сыворотки всех трех групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена - А и В - и принадлежит к группе АВ 0 (IV) при условии, что в течение 5 минут кровь этой группы с сывороткой группы АВ 0 (IV) в 7-й ячейке не дала агглютинации.

Выражение практического результата:

Группу крови записывают по общепринятым в странах СНГ правилам с обязательным указаниям буквенного обозначения выявленных агглютиногенов (агглютиногена), затем - агглютининов и в скобках римской цифрой - группа. Например, группа крови Иванова И.П. - 0ab (I), или Аb (II), или Вa (III), или АВ 0 (IV).

Результат реакции со стандартными сыворотками групп	Исследуемая кровь принадлежит к группе
Oab	Ab	Ba
(-)	(-)		O(I)
(-)	(-)	(-)
(+)	(-)	(+)	A(II)
(+)		(+)
(+)	(+)	(-)	B(III)
(+)	(+)	(-)
(+)	(+)	(+)	AB(IV)
(+)	(+)	(+)
Контроль с сывороткой группы AB(IV) (-)

Рис 1. Оценка результатов исследования группы крови по системе ABO

Определение группы крови цоликлонами: алгоритм

Все в организме человека обусловлено выработкой различных веществ. Не исключением является и группа крови, тип которой зависит от антигенного состава эритроцитов.

Современная медицина быстро развивается, и определение группы крови уже давно не в новинку. Существует множество методов ее определения. Одним из наиболее широко распространенных является определение группы крови цоликлонами.

Что это такое?

Цоликлоном называют специальное антитело, реагирующее с антигенами, расположенными на поверхности мембран эритроцитов. Для их получения используют методы генной инженерии – вначале получают специальные бактерии, которые вводят в организм мышей. После иммунизации организма мыши получают ее асцитную жидкость, из которой впоследствии и выделяют необходимые антитела.

Они представляют собой иммуноглобулины класса М.

Благодаря особой технологии изготовления, цоликлоны безопасны для человека в эпидемиологическом плане.

Вещество выпускается в виде водно-солевого раствора, который добавляют к имеющимся образцам крови. Для каждой группы антигенов имеется собственный раствор цоликлона – анти-А цоликлон имеет розовую окраску, анти-В – голубую, а цоликлон анти-D бесцветен.

Свое название препараты получили от названия места, где они были созданы – Центральный ордена Ленина институт переливания крови в Москве.

Методика определения

Определение группы крови цоликлонами может проводиться в нативной крови с добавлением консерванта или без него, а также при исследовании капиллярной крови, взятой из пальца. Непосредственно определение группы проводится на специальной пластине или планшете.

В первую очередь, на планшет наносится капля раствора цоликлона под соответствующей пометкой. Рядом с раствором цоликлона наносится капля исследуемой крови, и они смешиваются между собой. Определение группы крови цоликлонами проводится при равномерном покачивании пластины из стороны в сторону. Визуально, наблюдается агглютинация эритроцитов (слипание их между собой). Если результат отрицательный, агглютинации не происходит.

Процедура обязательно проводится при соблюдении определенного температурного режима – от 15 до 25 градусов тепла при нормальной освещенности. Перед проведением процедуры следует убедиться, что срок годности цоликлонов не истек.

В некоторых учреждениях с целью контроля за препаратами обязательно следует зафиксировать время открытия средства и срок его годности. Рекомендуется документально отразить срок годности реагента, если проводится определение группы крови цоликлонами. Фото используемых флаконов делают редко, однако подобная фиксация также возможна.

Интерпретация результатов

После проведения теста уже можно узнать, какая же группа крови у пациента.

Каковы же результаты исследования, если проводилось определение группы крови цоликлонами? Таблица сопоставления цоликлона и группы крови позволяет разобраться в полученных результатах.

цоликлон

Как видно из таблицы, если агглютинация произошла в ячейке пластины под номером 3 или 4, значит, кровь второй группы (агглютинация осуществилась за счет взаимодействия антигена А, расположенного на мембране эритроцита, и специального антитела, присутствующего в растворе анти-А-цоликлона). Соответственно, если агглютинация наблюдается в ячейке номер 5 или 6, то и группа крови – третья. Если агглютинации не произошло ни в одном указанном секторе, значит, исследуемая кровь не имеет антигенов, на что напрашивается вывод, что группа крови – первая.

Возможно, что агглютинация происходит во всех лунках. Обычно, это говорит о некачественном препарате либо нарушении правил проведения исследования.

Для чего проводится определение группы крови цоликлонами?

В настоящее время цоликлоны используются преимущественно для определения группы крови и резус-фактора. Исследование может проводиться как планово, по назначению участкового врача-терапевта, так и по экстренным показаниям, когда требуется переливание крови (в ходе операции произошла массивная кровопотеря или пациент был доставлен с обширной травмой и массивным кровотечением).

В поликлинике определение группы проводится преимущественно за счет использования сывороток. Группа крови по цоликлонам определяется чаще всего в стационаре или специализированных лабораториях.

К использованию цоликлонов прибегают, обычно, при невозможности использования сывороток.

Скорость получения результатов несколько быстрее, чем при исследовании стандартными сыворотками, что делает методику более универсальной. Многие лаборатории стремятся перейти на использование данного метода.

Препараты цоликлонов

Какие же есть разновидности цоликлональных препаратов?

Выделяют эритротест-цоликлон анти-D (есть три разновидности – супер, вызывающая прямую агглютинацию, просто анти-D-цоликлон, при добавлении которого развивается непрямая агглютинация, и анти-D-микс препарат, имеющий в своем составе компоненты первых двух). Они позволяют не только определить группу крови цоликлонами, но и выявить резус-принадлежность.

Другие растворы отличаются сугубо по названию, так как входящие в них антитела – иммуноглобулины классов М и G позволяют только типировать кровь по стандартным, АВ0, антигенам. Различие между ними заключается только в механизме слипания эритроцитов (прямая или непрямая агглютинация).

Каждый из данных препаратов имеет срок годности и особенности использования. Однако наибольшее распространение в клинической лабораторной диагностике получили только три препарата, указанные выше (анти-А, анти –В, анти-D).

Неправильная трактовка результатов

Иногда возможно получение ложных, недостоверных результатов. Например, агглютинация произошла во всех ячейках планшетки или при добавлении крови к препарату, например, изменился их цвет.

Чтобы предотвратить подобные результаты, если проводится определение группы крови цоликлонами, алгоритм процедуры предусматривает некоторые правила. В первую очередь следует обратить внимание на срок годности цоликлонов. Реагенты с истекшим сроком обращения использовать недопустимо.

Обязательно следует соблюдать и условия проведения процедуры. В помещении должно быть оборудовано рабочее место с достаточным освещением и температурным режимом. Если в инструкции к препарату описана и необходимая влажность в помещении, необходимо учитывать и ее.

Немаловажным является и чистота рабочей планшетки, загрязнение которой часто приводит к ошибкам в исследовании и получению неправильных результатов.

Где можно провести исследование?

Определение группы крови цоликлонами получает все большее распространение. Если раньше данная процедура проводилась только в специализированных стационарах (например, сугубо в отделениях хирургии и гематологии), то сейчас данная процедура доступна практически в любой оборудованной лаборатории.

Данная методика начинает распространяться и в поликлинической сети для экспресс-определения группы крови и скорейшего выставления диагноза пациенту.

Многие центры частной медицины и косметологии предлагают проведение данной услуги на платной основе. Бесплатно процедура, как уже было сказано, проводится при наличии направления терапевта.

Если нет возможности обратиться в поликлинику, то как определить группу крови по цоликлонам? При наличии дома специальной планшетки и набора препаратов, исследование можно проводить и самостоятельно, помня, однако, о необходимости соблюдения условий процедуры и особенно – стерильности.

Группы крови - это нормальные передающиеся по наследству различные иммунологические признаки крови. На основании этих признаков всех людей подразделяют на четыре группы вне зависимости от расовой принадлежности, возраста и пола. Группа крови у человека остается постоянной в течение всей его жизни. Люди одной группы крови отличаются от людей других групп крови наличием или отсутствием у них агглютиногенов (А и В), содержащихся в эритроцитах, и агглютининов α и β, содержащихся в сыворотке.

Группы крови системы AB0: 0(I) группа крови содержит агглютинины α и β, агглютиногены в ней отсутствуют; А (II) группа крови - агглютинин α и агглютиноген А; В(III) группа крови-агглютинина и агглютиноген В; AB(IV) группа крови - содержит агглютиногены А и В, агглютинины отсутствуют.

Реципиент - человек, которому переливают кровь, донор - человек, дающий свою кровь для переливания. Идеально совместимой для реципиента является кровь такой же группы. Кровь абсолютно несовместима, если у реципиента имеются агглютинины к эритроцитам донора, так как в этих случаях происходит соединение агглютиногена А одной крови с агглютинином а другой или агглютиногена В с агглютинином β. Развивается так называемая , т. е. склеивание эритроцитов в маленькие и большие комочки. Переливание несовместимой крови приводит к тяжелым последствиям и может быть причиной смерти. Реципиенту 0(I) группы нельзя переливать кровь никакой другой группы, кроме той же. У реципиента AB(IV) группы никаких агглютининов нет, поэтому ему можно переливать кровь всех групп. Реципиент AB(IV) группы - универсальный реципиент. Кровь 0(I) группы можно перелить людям с любой группы крови. Поэтому людей с 0(I) группой называют универсальными донорами.

Помимо агглютиногенов А и В, в эритроцитах встречаются иногда и другие агглютиногены (например, и др.). В тех случаях, когда кровь несовместима по резус-фактору (см.), производить переливание также нельзя во избежание серьезных осложнений, связанных с разрушением эритроцитов (гемолизом).

Перед каждым переливанием крови, проводимым по назначению и под наблюдением врача, необходимо обязательно проводить определение группы крови и выявлять ее совместимость.

Рис. 1-4. Определение групп крови со стандартными сыворотками (А, В, 0).
Рис. 1. Испытуемая кровь группы 0(I).
Рис. 2. Испытуемая кровь группы А (II).
Рис. 3. Испытуемая кровь группы В (III).
Рис. 4. Испытуемая кровь группы АВ (IV).

Методика определения групп крови . Для определения группы крови приготовляют чистую тарелку, карандаш для стекла, стандартные сыворотки 0(I), А(II) и В(III) группы крови, флаконы с изотоническим раствором хлорида натрия, спиртом и йодом, гигроскопическую вату, предметное стекло или стеклянные палочки и три пипетки, которые должны быть сухими (вода разрушает ).

Тарелку разделяют карандашом на три сектора, которые обозначают 0(I), А(I), В(III). На соответствующий сектор различными пипетками наносят по одной крупной капле стандартной сыворотки 0(I), А(II), В(III) группы крови. После того как из пипетки выпущена капля сыворотки, ее немедленно опускают в тот флакон, из которого она была взята. Палец перед взятием крови обтирают спиртом. После укола в мякоть пальца иглой выжимают каплю крови. Стеклянной палочкой или углом чистого предметного стекла переносят три капли крови (каждая величиной с булавочную головку) на тарелку рядом с сыворотками 0(I), А(II) и В(III) группы крови. Отметив на часах время, каждый раз новыми стеклянными палочками перемешивают кровь поочередно с сыворотками группы крови 0(I), А(II) и В(III), пока смесь не станет равномерно розового цвета. Определение группы крови производят в течение 5 мин. (следить по часам). По истечении этого времени к каждой капле смеси добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия. После этого тарелку с кровью слегка покачивают, наклоняя в разные стороны так, чтобы смеси хорошо перемешались с изотоническим раствором хлорида натрия, но не растекались по стеклу. При положительной реакции в течение первых минут от начала перемешивания еще до прибавления изотонического раствора в смеси появляются мельчайшие красные зернышки, состоящие из склеившихся эритроцитов. Мелкие зернышки сливаются в более крупные, а иногда в хлопья разной величины (явление агглютинации). При отрицательной реакции смесь остается равномерно окрашенной в розовый цвет. При проведении пробы с тремя перечисленными выше сыворотками для каждой группы крови может выпасть определенная комбинация положительных и отрицательных реакций (рис. 1-4). Если все три сыворотки дали отрицательную реакцию, т. е. все смеси остались равномерно окрашенными в розовый цвет, испытуемая кровь принадлежит 0(I) группе. Если отрицательную реакцию дала только сыворотка А(I) группы крови, а сыворотки 0(I) и В(III) группы крови дали положительную реакцию, т. е. в них появились зерна, то испытуемая кровь принадлежит к А(II) группе. Если сыворотка В(III) группы крови дала отрицательную реакцию, а сыворотки 0(I) и А(II) группы крови - положительную, то испытуемая кровь относится к В(III) группе. Если все три сыворотки дали положительные реакции, т. е. всюду появилась зернистость, испытуемая кровь относится к AB(IV) группе. Всякие иные комбинации указывают на ошибку в определении. Причины ошибок при определении групп крови и меры их предотвращения. 1. Избыток крови, если взята слишком большая капля. Капля крови должна быть в 10 раз меньше, чем капля сыворотки. 2. Если сыворотки слабы или эритроциты испытуемого плохо склеиваются, можно просмотреть агглютинацию (см.), так как реакция начинается поздно или бывает слабо выражена. Необходимо брать надежные сыворотки, активность которых проверена и срок годности не истек. 3. При низкой температуре окружающего воздуха может наступить неспецифическая холодовая агглютинация - панагглютинация. Прибавление изотонического раствора хлорида натрия с последующим покачиванием тарелки обычно уничтожает холодовую агглютинацию. Чтобы избежать этого, температура окружающего воздуха должна быть не ниже 12 и не выше 25°. 4. При долгом наблюдении смесь начинает подсыхать с периферии, где иногда появляется зернистость. При отсутствии зернистости в жидкой части смеси можно говорить об отрицательной реакции агглютинации.

Определив группу крови, врач должен тотчас же сделать запись на лицевом листе . После окончания работы тарелку, пипетки и предметные стекла нужно тщательно вымыть под краном теплой водой, вытереть насухо и поставить в шкаф. в ампулах или флаконах хранятся в сухом и теплом помещении в запертом на ключ шкафу при t° не выше 20°.

Определение группы крови по стандартным эритроцитам (так называемая двойная реакция) применяют лишь в лабораториях и на станциях . В повседневной работе пользуются реакцией агглютинации со стандартными сыворотками по описанной выше методике.