Ставиться на совокупности данных анамнеза,конфронтации,клинической картины и лабораторных данных,включающих обнаружение возбудителя и результатов серологического обследования.Подтверждение диагноза лабораторными данными обязательно.

Методы диагностики,подтверждающие наличие сифилиcа

Наименование	Метод проведение	Подтверждающие признаки
	Распрос больного	Подтвержденный диагноз сифилиса у полового партнера Случайная половая связь без барьерного предохранения в период,соответствующий инкубационному периоду Наличие в прошлом высыпаний в области половых органов,увеличения лимфоузлов
Клинический осмотр	Осмотр половых органов,кожных покровов,слизистой рта,ануса Пальпация высыпных элементов при их наличии Пальпация периферических лимоузлов	Наличие характерных для различных периодов сифилиса поражений кожи и слизистых. Увеличение лимфоузлов
Обнаружение T.pallidum в материале из очагов поражения,лимфатических узлов,амниотической жидкости,ликвора		Обнаружение типичных форм трепонемы
		Обнаружение специфической ДНК T.pallidum
Реакция связывания комплимента (Реакция Вассермана)

Методы диагностики, подтверждающие наличие различных форм и осложнений сифилиса

Наименование	Формы и осложнения
Исследование ликвора	Нейросифилис
Ренгенография аорты длинных трубчатых костей грудины костей черепа суставов	Ранний врожденный сифилис Поздний врожденный сифилис Третичный сифилис
Сурдологическое обследование	Неврит слухового нерва Сифилитический лабиринтит
Офтальмологическое обследование	Неврит зрительного нерва Паренхиматозный кератит

Также применяются и рутинные методы исследования - общие анализы крови и мочи,биохимический анализ крови и.т.д.

Что такое серологическая диагностика сифилиса

В большинстве случаев обнаружить возбудителя сифилиса невозможно или обнаружение
его затруднительно.Поэтому для диагностики сифилиса применяют так называемое серологическую диагностику,основанную на определении различных видов и классов антител,которые организм выработал с целью своей защиты от сифилитической инфекции т.е определяется не возбудитель инфекции,а как организм прореагировал на его появление.
Серологическое исследование (от от лат. serum - сыворотка) представляет собой лабораторный анализ плазмы каппилярной или венозной крови основаный на иммунологической реакции антиген-антитело.
В качестве антигенов используют фабрично изготовленные препараты,аналогичные по своей структуре антигенам липидов,появляющихся в организме при разрушении тканей бледной спирохетой,липидам ее мембран и специфическим молекулярным соединениям,входящих в состав мебраны бледной спирохеты (для этих целей используются очищенные и ультраозвученные штаммы трепонем или выделенные от них рекомбинантные антигены).
В лабораторных условиях к антигенам добавляется сыворотка крови обследуемого.Если в сыворотке (плазме) крови присутствуют антитела происходит реакция антиген-антитело и ее результаты обнаруживаются различными методами (положительный результат) при отсутствии антител реакция не происходит (отрицательный результат).Серологическую диагностику сифилиса осуществляют в следующих случаях.

Скрининг на сифилис

Массовое обследование определенных групп населения.Для скрининга применяются дешевые,простые и быстрые по исполнению тест системы,основанные на нетрепонемных тестах.Скринингу на сифилис подвергаются:

• Беременные женщины
• Доноры крови и органов для трансплантации
• Некоторые профессиональные контингенты (работники питания,образования,здравоохранения)
• Военнослужащие
• Лица,отбывающие наказание в местах лишения свободы
• Больные,готовящиеся к оперативному хирургическому вмешательству
• Лица,поступившие на стационарное лечение (обязательная вассерманизация - в России,странах СНГ и некоторых других странах)

Диагностика сифилиса

Для диагностики сифилиса применяются комбинация нетрепонемных и трепонемных тестов на сифилис или только трепонемные (подтверждающие) реакции.Серологическое обследование на сифилис назначается в следущих случаях:

• Лицам,имеющих клинические признаки сифилиса
• Лицам с любыми генитальными язвами
• Лицам - половым партнерам больных сифилисом,а также в случае близкого бытового контакта с больным вторичным сифилисом
• Детям,родившимся от больных сифилисом матерей
• Лицам с подтвержденным диагнозом других половых инфекций
• Для подтверждения результатов скрининга (отборочных реакций)

Контроль за лечением сифилиса

Применяются нетрепонемные тесты,так трепонемные тесты остаются положительными продолжительное время после лечения,а иногда всю жизнь.

Что такое нетрепонемные тесты

Нетрепонемные тесты определяют антитела класса IgG и IgM к липидам(фосфолипидам),
липопротеинам, высвобождаемых из поврежденных клеток хозяина, вследствии сифилитической инфекции и липидам,входящим в состав мембраны бледной трепонемы. Антилипидные антитела могут появляться не только вследствие сифилиса или других трепонематозов , но и в ответ на на некоторые острые и хронические заболевания, при которых наблюдается разрушение тканей.Антилипидные антитела (реагины) образуются через 7-14 дней после образования шанкра или через 4-5 недель после инфицирования.В основном нетрепонемные тесты применяются в двух случаях:

• Нетрепонемные тесты, в связи с дешевизной,доступностью простотой и быстрым сроком исполнения, применяются для скрининга сифилиса как отборочные реакции.
• По изменению количественных нетрепонемных тестов судят о степени эффективности лечения сифилиса и устанавливают его излеченность.Поэтому нетрепонемные тесты применяются в комбинации с трепонемными тестами для установки диагноза сифилиса и проводятся до начала лечения,в процессе лечения и после окончания лечения в определенные временные интервалы.

В качестве антигена для проведения нетрепонемных тестов используется стандартный кардиолипин-лецитин -холестероловый антиген (который является одним из компонентов тканей человеческого организма и содержит липиды, характерные для бледной трепонемы) для проведения микрореакции преципитации,в случае определения реагинов реакцией связывания комплимента(реакции Вассермана),помимо кардиолипинового антигена применяют еще и ультразвуковой дезинтеграт культуральных трепонем (трепонемный антиген).К нетрепонемный тестам относят:

• RPR (Rapid Plasma Reagins) тест быстрых реагинов (российский аналог микрореакция преципитации МР)
• VDRL (Venereal Disease Research laboratory)
• Реакция связывания комплимента (реакция Вассермана)

Недостатки нетрепонемных тестов

• Ложноотрицательные результаты - при исследовании неразведенных образцов сыворотки, содержащих большое количество антител,за счет так называемого феномена прозоны. Это явление может наблюдаться на ранних стадиях сифилиса и у пациентов с сопутствующей ВИЧ-инфекцией.
• Недостаточная чувствительность для диагностики поздней стадии сифилиса
• Ложноположительные результаты (биологические ложноположительные реакции) при наличии других острых или хронических заболеваний.

Что такое трепонемные тесты

Как и при нетрепонемных тестах при проведении трепонемных тестов используется иммунологическая реакция антиген-антитела.Но в качестве антигенов применяются трепонемные антигены - либо интактные трепонемы либо очищенные и ультраозвученные трепонемы либо рекомбинантные антигены.Для проведения и обнаружения результатов реакции антиген-антитела используют более сложные и дорогие различные методы.Наиболее часто используются следующие трепонемные тесты.

• Реакция иммунофлюоресценции (РИФ -FTA) в различный модификациях
• Реакция пассивной агглютинации (РПГА - TPHA)
• Иммуноферментный анализ (ИФА -EIA) в том числе рекомбинатный ИФА
• Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)
• Иммуноблотинг

Что такое иммуноблотинг

Иммуноблотинг (Western blot) для определения специфических IgM либо IgG является одним из современных и точных методов диагностики сифилиса.При проведении иммуноблотинга T.pallidum подвергаются электрофорезу, в результате чего происходит разделение белковых иммунодетерминант. Затем проводится обработка разделенных точек - blots исследуемой сывороткой и антителами к IgG либо IgM, помеченных ферментами или радиоактивными веществами. Выявленные с помощью иммуноблотинга определенные иммунодетерминанты являются диагностическими признаками сифилиса.
IgG-иммуноблотинг (IgG Western blot)по чувствительности и специфичности соответствует РИФ-абс.IgM -иммуноблотинг (IgM Western blot) применяется как диагностический тест при врожденном сифилисе.

Какая динамика серологических реакций при сифилисе

Антилипидные (неспецифические) антитела образуются через 7-14 дней после образования шанкра или через 4-5 недель после инфицирования.Специфические противотрепонемных антител класса IgM,обнаруживатся в конце второй недели заболевания. IgG к трепонемным антигенам появляются приблизительно через 4 недели после начала заболевания.К моменту появления клинических симптомов сифилиса в сыворотке крови пациентов можно выявить как специфические IgM, так и специфические IgG (суммарные антитела).Параметры иммунного ответа могут изменяться в результате проводимого лечения.Адекватное лечение раннего сифилиса приводит к быстрому снижению титров неспецифических антител и специфических IgM, при этом специфические IgG обычно сохраняются в сыворотке крови в течение длительного периода времени,а иногда и всю жизнь.

Сроки появления положительных серологических реакций при сифилисе

Частота положительных результатов серореакций при разных стадиях сифилиса

Test	Первичный	Вторичный	Скрытый	Третичный

Как интерпретировать тесты на сифилис

В мировой медицинской практике для диагностики сифилиса используют три реакции: нетрепонемный тест - RPR или VDRL и два трепонемных тестов - реакцию иммунофлюоресценции (РИФ-FTA) и реакцию пассивной гемоагглютинации (РПГА - TPHA)

			Интерпретация
			нет сифилиса или инкубационный период или очень ранняя стадия
			нелеченый или недавно леченый сифилис
			первичный сифилис или ложноположительные РПР и РИФ
			ложноположительные РПР и РПГА или ложноотрицательная РИФ
			леченый сифилис или нелеченый поздний сифилис
			биологическая ложноположительная реакция
			ранний первичный сифилис или недавно леченый сифилис или ложноположительная РИФ
			пролеченый сифилис или ложноположительная РПГА

В России для диагностики сифилиса еще применяют реакцию связывания комплимента (реакцию Вассермана) и реакцию иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Первичный сифилис

При первичном серонегативном периоде сифилиса бывают положительные РИФ и Ig ИФА как наиболее чувствительные серореакции. Однако это не является основанием для постановки таким больным диагноза первичного серопозитивного сифилиса.У ряда больных в этом периоде бывает изолированный положительный результат при постановке реакции Вассермана с трепонемными или с кардиолипиновым антигенами. В конце 3-й или в течение 4-й недели после появления шанкра становятся положительными стандартные серологические реакции - с этого момента начинается первичный серопозитивный период сифилиса. На 1-2-й неделе первичного серопозитивного сифилиса отмечается увеличение степени позитивности серореакции (1+, 2+, 3+) и нарастание титра реагинов (1:5, 1:10, 1:20). РИФ и ИФА уже у всех больных дают резко положительный результат, но РИБТ, как правило, отрицательная или процент иммобилизации очень низок. Диагноз первичного серопозитивного сифилиса ставится и тем больным, у которых осадочные реакции и реакция Вассермана с неспецифическими антигенами дали даже однократный слабоположительный результат. При дальнейшем течении первичного сифилиса все серологические реакции становятся резко положительными (4+); титр реагинов достигает 1:80, 1:160, РИФ продолжает быть резко положительной, но РИБТ у большинства больных еще остается отрицательной или может стать слабоположительной.

Вторичный сифилис

При вторичном свежем сифилисе резко положительный результат по всем стандартным серологическим реакциям наблюдается почти в 100% наблюдений; титр реагинов наиболее высок - 1:160; 1:240 или 1:320. РИФ - 4+; РИБТ дает положительнй результат более чем у половины больных, однако процент иммобилизации трепонем невысок (40-60%).
При вторичном рецидивном сифилисе положительный результат по стандартным серологическим реакциям отмечается в 96-98% наблюдений. Отрицательные результаты могут иногда объясняться малосимптомным рецидивным течением, наличием астенизации и сочетанием сифилиса и ВИЧ-инфекции. РИБТ дает положительный результат у 85-90% больных при выраженной степени иммобилизации - 80-90-100%.

Третичный сифилис

Третичный сифилис характеризуется положительными результатами по стандартным серологическим реакциям в 50-90% наблюдений и положительной РИБТ у 92-100% пациентов с высоким процентом иммобилизации.

Скрытый сифилис

Диагноз скрытого серопозитивного сифилиса, как указывалось выше, устанавливают только по положительным серореакциям в крови с обязательным подтверждением их по РИБТ, так как только РИБТ (и в меньшей степени РИФ) позволяет отдифференцировать ложноположительные серореакции (даже с позитивностью в 2+ или 3+) от истинно положительных.

Нейросифилис и висцеральный сифилис

Разные формы сифилиса нервной системы и висцерального сифилиса имеют различную частоту и выразительность стандартных серореакции. Так, прогрессивный паралич в 100% случаев сопровождается резко положительными всеми стандартными серологическими реакциями. Сифилис сосудов мозга, спинная сухотка, сифилитическое поражение сердечно-сосудистой системы сопровождаются положительными серореакциями лишь в 40-50-60% наблюдений. Однако РИБТ почти при всех перечисленных патологических состояниях дает резко положительный результат (90-100% иммобилизации).

Врожденный сифилис

При диагностировании врожденного сифилиса в первые 2 мес после рождения стандартные серологические реакции у ребенка не определяют, т. к. они могут быть положительными за счет пассивной передачи реагинов через плаценту. По этой же причине не имеет значение и положительный результат РИБТ. Пассивно переданные от матери ребенку имобилизины самопроизвольно исчезают в течение 6 мес после рождения. Если ребенок инфицируется незадолго до родов, то в этом случае РИБТ будет еще отрицательной (в связи с более поздним образованием иммобилизинов), несмотря на наличие в организме ребенка сифилитической инфекции.
При врожденном сифилисе детей грудного возраста с активными проявлениями стандартные серореакции могут быть отрицательными в 1% наблюдений.При врожденном сифилисе раннего детского возраста отрицательные стандартные серореакции варьируют от 15 до 20%, но в этих случаях РИБТ дает положительные данные у 90-98% детей.При позднем врожденном сифилисе даже при наличии активных проявлений стандартные серореакции констатируются лишь у 70-80% обследованных, но зато РИБТ четко положительная у 100% больных с высоким титром иммобилизинов.

Положительные серореакции при отсутствии симптомов сифилиса

Это самый сложный вопрос в сифилидологии - положительные серореакции на сифилис при отсутствии клинических симптомов.
Различают пять ситуаций

Скрытый сифилис

• нетрепонемные тесты (МР -RPR,VDRL) - положительные (хотя при позднем скрытом сифилисе - давность заболевания более 2 лет -могут быть отрицательные)
• нет документированного свидетельства о полученном адекватном лечении сифилиса

Рекомендации - проведении лечения скрытого сифилиса по существующим инструкциям

Серопозитивность после лечения сифилиса

• нетрепонемные тесты (МР -RPR,VDRL) - положительные,отмечается снижение титров в течении года в 4 и более раза

Рекомендации:Если контрольные тесты не проводились - назначается количественный нетрепонемный тест (МР) в течении года с интервалом в 3 месяца

Серорезистентность после лечения сифилиса

• трепонемные тесты (РПГА,РИФ,ИФА с трепонемным антигеном) положительные или отрицательные - значения не имеет
• нетрепонемные тесты (МР -RPR,VDRL) - положительные,отмечается их стабильность или снижение титров в течении года менее чем в 4 раза
• есть документированное свидетельство о полученном адекватном лечении сифилиса

Рекомендации:Дополнительное лечение сифилиса

Излеченный сифилис

• трепонемные тесты (РПГА,РИФ,ИФА с трепонемным антигеном) положительные
• нетрепонемные тесты (МР -RPR,VDRL) - отрицательные
• есть документированное свидетельство о полученном адекватном лечении сифилиса

Рекомендации:Снятие с учета

Если нет документированного свидетельства о полученном адекватном лечении сифилиса в прошлом см.ситуация №1 или дополнительно:
-исключить ранний сифилис (серонегатив)- контрольный трепонемный и нетрепонемный тест через 2 недели
-исключить поздний скрытый сифилис - исследование ликвора,клинико-рентгенологическое исследование
-исключить ложноположительный трепонемный тест (провести 2-3 трепонемных теста,включая РИБТ) в динамике
-исключить невенерический трепанематоз
-провести лечение позднего скрытого сифилиса по существующим методикам.

Ложноположительные реакции на сифилис

• трепонемные тесты (РПГА,РИФ,ИФА с трепонемным антигеном) отрицательные
• нетрепонемные тесты (МР -RPR,VDRL) - положительные
• наличие документированных свидетельств о полученном адекватном лечении сифилиса не имеет значения



• The value of darkfield microscopy in the differential diagnosis of secondary syphilis (Calif West Med. 1926) Full text
• Результаты сравнительного изучения диагностической эффективности ряда современных нетрепонемных и трепонемных тестов
• Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis (Clin Microbiol Rev. 1995)

В России улучшается год от года. Однако ежегодно на тестированиях выявляют тысячи заболевших людей. Обследования на эту болезнь проводят и перед беременностью, и перед любой плановой госпитализацией. Кроме того, ежегодно представители многих профессий проходят диспансеризацию, при которой, кроме всего прочего, нужно сдать анализы на сифилис. И, разумеется, без этого анализа для человека будет закрыта карьера государственного служащего, врача, да и просто вакансии вроде учителей, поваров, воспитателей.

Современная медицина знает множество способов обнаружить бледную трепонему, которая является возбудителем болезни, в крови человека. Эти методы разделяют на несколько больших групп:

1. В первой группе исследований - тесты, при которых в биоматериале ищут присутствие трепонемы. Для этого на исследования забирают материал из язв или пораженных болезнью органов.
2. Вторая, серологическая группа методов позволяет выявить косвенные следы присутствия трепонемы в организме. Здесь подразумеваются антитела, активной выработкой которых организм реагирует на инфекцию.

Мнение эксперта

Артем Сергеевич Раков, врач-венеролог, стаж более 10 лет

Прямые тесты отлично работают при первых симптомах заболевания, серологические стоит проводить примерно через неделю после появления первой язвы. Иными словами, при подозрении на заражение лучше всего прибегнуть к тестам прямого типа.

Лабораторная диагностика сифилиса

Лабораторное исследование заключается в том, что в пробирке размножают участки ДНК трепонемы в условиях повторяющихся температурных циклов. На каждом этапе количество искусственно воспроизведенных копий возбудителя болезни удваивается. Специалисты называют это амплификацией фрагментов ДНК. Происходит разделение молекул по их весу, что и позволяет выявить трепонему.

ПЦР

Методика ПЦР-исследования позволит отыскать одну молекулу сифилиса даже в том случае, если она одна на тысячи других молекул. Генетический материал для ПЦР-тестирования могут забирать из непосредственно сифилитических язв, ликвора, плацентарной ткани, крови из пальца и даже семенной жидкости. Наиболее часто врачи используют именно тканевую жидкость из язв.

Эффективность ПЦР-исследования достигает 98,6%. При правильно подготовленном исследовании ложноположительные результаты при этом методе практически исключены. Также именно к данной методике врачи прибегают, если предполагают небольшое содержание трепонем в исследуемом материале. Именно этот фактор становится определяющим, если необходимо провести анализ при подозрении на врожденный сифилис.

Темнопольная микроскопия

Темнопольное микроскопическое исследование считается одним из самых дешевых, но вместе с тем эффективных методов выявления наличия бледной трепонемы, а также:

1. Для исследования используют специальный солевой раствор, в который помещают препарат. После этого на предметное стекло направляют узкий пучок яркого света. Из-за так называемого феномена Тиндаля возбудители болезни начинают светиться в темном поле раствора.
2. Лучшим материалом для подобного типа исследования также являются пробы тканевой жидкости, полученной из генитальных язв, расположенных, соответственно, на гениталиях. Это один из самых быстрых тестов, потому что результаты анализов будут готовы через несколько часов.

Однако стоит учитывать, что темнопольный метод годится для обнаружения еще живых трепонем. Соответственно, проходить такое исследование после начала наружного лечения практически не имеет смысла, так как будет почти невозможно обнаружить живые образцы возбудителя.

RIT-тест

RIT-тест предполагает пересаживание материала от зараженного человека лабораторным кроликам. Чувствительность этих животных к инфекции сифилиса достигает 100%, так что если в биоматериале пациента содержались бледные трепонемы, то они поразят и кролика.

Однако на сегодняшний день этот метод практически не используют в силу дороговизны и временных затрат. При наличии более быстрых анализов врачи предпочитают не ждать, когда симптомы болезни проявятся у животного. Тем не менее этот метод продолжают использовать в исследовательских работах, а также для того, чтобы подтвердить или опровергнуть точность других типов анализов.

Серодиагностика сифилиса

Серологические методы позволяют вычленить не сам возбудитель сифилиса в организме, а антитела, с помощью которых организм старается победить заболевание. Ученые подразделяют серологические методы на две группы, речь о которых пойдет ниже.

К нетрепонемным тестам относятся:

• РМП - реакция микропреципитации с плазмой и инактивированной сывороткой;
• RPR - тест быстрых плазменных реагинов.

Чаще всего специалисты прибегают к нетрепонемным тестам в том случае, если необходимо сделать массовый скрининг на сифилис. Это связано с тем, что такие тесты достаточно дешевы, не требуют специального лабораторного оборудования и отличаются сравнительно высокой точностью.

Также они не менее эффективны при оценке проводимого лечения. С их помощью можно оперативно следить за уровнем антител к сифилису в крови.

К трепонемным тестам относятся:

1. ИФА - иммуноферментный анализ;
2. РПГА - реакция пассивной гемагглютинации;
3. РИФ - реакция иммунофлюоресценции;
4. иммуноблоттинг;
5. ИХЛ - иммунохемилюминесценция;
6. РИБТ (РИТ) - реакция иммобилизации бледных трепонем.

Трепонемные тесты назначают в тех случаях, когда нужно убедиться, что результат нетрепонемного теста не был ложноположительным. К ним же прибегают в тех случаях, если результат скрининга при помощи трепонемного теста разошелся с результатом нетрепонемного.

Кроме того, трепонемные тесты отлично подходят для применения в том случае, если у болезни еще нет видимых проявлений, но присутствуют подозрения врача, основанные на анамнезе и результатах осмотра. К сожалению, нетрепонемные тесты в этот период малоэффективны и зачастую дают ложноотрицательные результаты.

Экспресс-диагностика сифилиса

Этот тип диагностики наиболее часто используется для определенных групп пациентов:

• Подобным тестом стоит воспользоваться каждой беременной женщине, чтобы обезопасить и себя, и будущего ребенка.
• Кроме того, воспользоваться таким методом могут люди, которые проживают в одном помещении с сифилитическими больными, не применяют контрацепцию и часто меняют половых партнеров. Также он подойдет тем, кто не может пройти полноценное обследование в больнице или клинике.

Принцип использования экспресс-теста на сифилис можно сравнить с использованием теста на беременность, однако в нем надо брать несколько капель крови.

Тест лучше всего проводить в первой половине дня натощак. За два дня до предполагаемого тестирования врачи рекомендуют не употреблять спиртное, а примерно за час до процедуры отказаться от сигарет.

Сам анализ занимает немного времени:

1. Палец необходимо продезинфицировать спиртовой салфеткой, после чего из пореза выдавить несколько капель крови на тест-устройство.
2. Затем добавить туда же идущий в комплекте реагент.
3. В среднем нужно подождать 15 минут до появления результата. Специалисты предупреждают, что если результат появился по истечении получаса, то он может быть ложным.

Как вы считаете, какой метод диагностики самый точный?

Серодиагностика Экспресс-диагностика

Стоит учитывать, что если человек заразился совсем недавно, то точность и достоверность подобного тестирования не превышает 80%. Так что приравнивать его к полноценному обследованию у специалиста точно не стоит.

Где можно сдать анализ на сифилис?

Заказать исследование биоматериала на сифилис можно:

• в любой поликлинике;

• частной клинике;

• лаборатории.

Преимущество бюджетных учреждений состоит в том, что там эта услуга бесплатна. Существенный минус заключается во времени ожидания анализа, слабом материально-техническом обеспечении некоторых государственных поликлиник и в том, что если сифилис выявят, то скрыть этот факт будет затруднительно.

Частные клиники и лаборатории согласны работать с пациентами на условиях конфиденциальности. Это подойдет тем, кто не хотел бы, чтобы о его заболевании стало известно. Но следует помнить, что бланк с результатом, где не фигурирует имя пациента, не подлежит приему ни в одной организации.

Разумеется, за анализ в частном учреждении придется заплатить, но и результат можно будет узнать через 2-3 дня. Более того, многие клиники без проблем предлагают экспресс-тестирование и сообщают о результатах анализов уже через пару часов.

Сколько стоит сдать анализ на сифилис?

Ценник на анализ зависит от его вида. Скрининговое исследование обойдется пациенту в 300-400 рублей . Анализ, при котором определяют наличие ДНК в том или ином типе биоматериала, будет стоить в районе 500 рублей.

Разумеется, цены варьируются в зависимости от лабораторий, используемых материалов и итоговой точности самого теста. В этом случае нередко работает правило, согласно которому чем тест дороже, тем он точнее.

Сифилис - коварное заболевание, которое медленно, но верно не только уничтожает внутренние органы, но и затрагивает всю нервную систему человека. К счастью, эта болезнь развивается неспешными темпами, а наука выявила эффективные методы борьбы с ней еще в то время, когда изобрела пенициллин, к которому трепонемы уязвимы до сих пор. Так что главное - вовремя пройти качественное обследование, а после этого обратиться к знающему врачу.

Также вы можете посмотреть видео в этой статье, где врач расскажет вам о РИФ анализе на сифилис.

Номера страниц в выпуске: 34-39

А.Ю.Миронов, Ю.Б.Терехова

ММА им. И.М.Сеченова

Лабораторная диагностика сифилиса
Сифилис весьма многолик, характеризуется богатой палитрой манифестных и латентных форм, полисиндромностью поражений, распознавание которых основывается на комплексном клинико-лабораторном обследовании больного.
Материалом для исследования от больных сифилисом служит кровь, отделяемое твердого шанкра, пунктат регионарных лимфатических узлов. Выбор материала для исследования и метода микробиологической диагностики определяется стадией патогенеза болезни.
Лабораторная диагностика включает бактериоскопический (в начальной стадии) и серологический методы. Бактериологическое исследование обычно не проводят, так как доступные методы выделения чистой культуры возбудителя не разработаны.
В связи с тем, что возбудитель сифилиса - Treponema pallidum - в отличие от других микроорганизмов плохо культивируется на питательных средах in vitro, а также слабо воспринимает анилиновые красители, все существующие методы ее детекции можно подразделить на прямые и непрямые.
Прямые тесты основаны на непосредственном выявлении возбудителей в очагах поражения. К ним относятся: темнопольная микроскопия и RIT (rabbit infektivity test) - заражение материалом от больных кроликов. Непрямые тесты основаны на выявлении АТ к возбудителю сифилиса в сыворотке крови. Это серологическая диагностика, а также редко используемые гистологические исследования.
Все существующие в настоящее время серологические тесты на сифилис подразделяются на две основные группы:
. нетрепонемные [реакция связывания комплемента с кардиолипиновым АГ (РСКк), реакция микропреципитации (РМП), тест быстрых плазменных реагинов Rapid Plasma Reagins (RPR), Veneral Disease Research Laboratory (VDRL), тест с толуидиновым красным - Toluidin Red Unheated Serum Test (TRUST)];
. трепонемные [реакция связывания комплемента с трепонемным АГ (РСКт), реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ или РИТ), реакция иммунофлюоресценции (РИФ) (за рубежом - FTA - Fluorescent Treponema l anibody) с вариантами: РИФ-200 (FTA-200), РИФ-абс (FTA-abs), реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) - за рубежом - Treponema pafluidum haemagglutination assay (TPHA), иммуноферментный анализ (ИФА) - за рубежом - Enzymelynked immunosorbent asay (ELISA), иммуноблоттинг (Western Blot)].
Прямая визуализация трепонем методом темнопольной микроскопии является убедительным доказательством трепонемной природы заболевания. Наиболее эффективен этот метод при первичном и вторичном сифилисе, наличии поражения кожи и слизистых оболочек. При микроскопии следует дифференцировать Т. pallidum , подвид pallidum, с нитями фибрина, а также с трепонемами нормальной микрофлоры организма человека - Т. refringens и Т. denticola. Т. refringens колонизирует слизистые оболочки наружных половых органов и отличается выраженной подвижностью и отсутствием сгибательных движений. Т. denticola колонизирует слизистую оболочку ротовой полости, ее завитки короче и направлены под более острым углом.
Темнопольная микроскопия обладает чувствительностью 74-86% и специфичностью до 97% в зависимости от квалификации исследователя. Чувствительность может снижаться, если повреждение было протерто антисептиком. Вместе с тем отрицательный результат, обусловленный различными факторами, не является основанием для исключения диагноза сифилиса и требует дальнейшего подтверждения методами серологической диагностики. Кроме того, с помощью этого метода невозможно наблюдать за динамикой инфекционного процесса и оценивать эффективность терапии.
Прямой тест на Т. pallidum с флюоресцентными антителами (DFA-TP) использует флюоресцеинконъюгированные АТ для окраски организма в мазках и срезах тканей. DFA-TP не требует подвижных организмов, является более чувствительным и специфичным, но более дорогим и технически сложным, чем темнопольная микроскопия. На чувствительность обоих микроскопических методов может отрицательно повлиять давность возникновения или состояние повреждения, а также то, получал ли пациент лечение. По данным ряда зарубежных авторов, к прямым методам определения Т. pallidum относятся методы, базирующиеся на амплификации нуклеиновых кислот, такие как ПЦР, которые могут определять наличие всего 10 трепонем в повреждениях, тканях плаценты и других тканях организма. Они существенно улучшили чувствительность и специфичность прямых методов детекции. Множественный ПЦР с одновременным определением Т. pallidum , вируса герпеса типа 2 и Haemophilis ducreyi используется для постановки этиологического диагноза у пациентов с GUD (genital ulcer disease), а также для обоснования алгоритмов синдромного лечения. Поскольку ПЦР-методики для сифилиса коммерчески недоступны, они остаются инструментом исследователей. Биологический метод диагностики, несмотря на его высокую чувствительность, применяется весьма ограничено из-за длительности получения результатов и высокой стоимости. Он практически не используется в настоящее время. Сегодня ведущая роль в лабораторной диагностике сифилиса принадлежит серологическим методам исследования (приказ №87 от 26.03.2001 Минздрава РФ "О совершенствовании серологической диагностики сифилиса"), так как Т. pallidum порождает иммунные ответы различного характера (рис. 2).
В нетрепонемных тестах применяется АГ нетрепонемного происхождения (как правило, кардиолипин-лецитин-холестериновый АГ). АТ к фосфолипидным АГ на поверхности трепонем дают перекрестную реакцию с кардиолипиновыми АГ млекопитающих. Флоккуляционные (хлопьеобразующие) методики для обнаружения этих АТ к фосфолипидам были разработаны как неспецифичные скрининговые тесты. К ним относятся РМП и ее модификации: RPR-, VDRL-, TRUST-тест. В данных тестах обнаруживаются IgG- и IgM-АТ к липидам клеточной стенки Т. pallidum , которые появляются в крови примерно через 1 нед после формирования твердого шанкра. Эти тесты просты, быстры, недороги и обладают превосходной чувствительностью, особенно в ранний период инфекции. Главные недостатки - невозможность использования цельной крови, необходимость ротатора или микроскопа, возможность ложноположительных результатов. У беременных женщин до 28% положительных результатов RPR могут быть биологически ложноположительными. Ложнонегативные результаты могут быть при избытке АТ, что известно как феномен prozone. Перекрестная реактивность может иметь с другими трепонемными инфекциями, включая фрамбезию и пинту.
Нетрепонемные тесты могут быть качественными или полуколичественным. RPR- и VDRL-титры возрастают у пациентов с острой инфекцией, реинфекцией или реактивацией давней инфекции, которая не былa удовлетворительно вылечена. Около 72-84% пациентов с первичным или вторичным сифилисом демонстрируют 4-кратное снижение RPR- и VDRL-титров через 6 мес после завершения правильного лечения. Скорость серореверсии зависит от титра до лечения и стадии заболевания. Индивиды с первым эпизодом инфекции более склонны к серореверсии, чем индивиды с повторной инфекцией. Поэтому нетрепонемные тесты используются не только для определения активной инфекции, но и для наблюдения за эффективностью лечения (см. рис. 2).
Трепонемные тесты, такие как РСКт, РИБТ или РИТ, РИФ (за рубежом - FTA и FTA-ABS), РПГА (TPHA или ТРРА), используются для подтверждения позитивных скрининговых тестов, распознавания ложноположительных результатов нетрепонемных тестов, при клиническом, эпидемиологическом и анамнестическом подозрении на сифилис, для диагностики скрытых форм заболевания, установления ретроспективного диагноза пациента. В трепонемных тестах применяются АГ трепонемного происхождения.
РИТ и РИФ обладают более высокой чувствительность (74-94 и 84-99%) и специфичностью (99 и 97% соответственно) и применяются для подтверждения результатов отборочных реакций, распознавания ложноположительных результатов РМП и РСК, а также установления ретроспективного диагноза сифилиса. Недостатками этих методов является техническая сложность, длительность постановки, субъективизм в оценке результатов, высокая стоимость исследования, необходимость высококвалифицированных сотрудников. Следует учитывать также, что, по данным ряда авторов, примерно у 85% адекватно пролеченных больных трепонемные тесты остаются положительными в течение нескольких лет и даже в течение всей жизни, поэтому не могут быть использованы в качестве контроля излеченности. Трепонемные тесты дороги, требуют оборудования и технической подготовки, доступны только в центральных лабораториях.
Иммуноблоттинг предполагался как альтернатива РИФ-абс (FTA-ABS) в качестве подтверждающего теста. Он более чувствителен, чем РИФ-абс (FTA-ABS), но менее чувствителен, чем РПГА (ТРРА). Частота ложноположительных результатов немного меньше в трепонемных тестах, чем в нетрепонемных. Трепонемные тесты обычно не используются для скрининга, поскольку они не так чувствительны, как нетрепонемные, в первые 2-3 нед первичной стадии сифилиса. ТрепонемныеТрепонемные АТ часто персистируют в течение жизни, делая эти тесты менее применимыми в качестве подтверждающих в областях с высокой распространенностью заболевания; они также неприменимы для наблюдения за эффективностью лечения.
В последние годы в отечественную практику лабораторной диагностики сифилиса внедряются стандартизированные высокоинформативные методы серодиагностики - ИФА и РПГА. Принцип ИФА заключается в соединении комплекса АГ-АТ с конъюгатом, содержащим ферментную метку, выявляемую с субстратной смеси. РПГА применяется для выявления специфических АТ к T. pallidum в сыворотке крови: при соединении АГ T. pallidum со специфическими АТ в реакции на микропланшете наблюдается феномен агглютинации эритроцитов. Плюсами данных методов является то, что тест-системы для ИФА и РПГА сертифицированы и регулярно контролируются соответствующими организациями. Из-за простоты постановки, возможности автоматического учета и быстроты получения результатов при исследовании огромного количества проб ИФА и РПГА могут использоваться как в качестве отборочных, так и подтверждающих реакций, поскольку превосходят по чувствительности, специфичности, воспроизводимости КСР и не уступают РИТ и РИФ. Но, следует отметить, что ИФА, как и другие реакции на сифилис, могут давать как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты. Первые могут возникнуть за счет ревматоидного фактора, представляющего собой IgG человека, за счет перекрестно реагирующих с трепонемными АГ АТ, образующихся при различных системных заболеваниях или индуцированных лекарственными препаратами, наркотиками, нарушениями обмена; у новорожденных - путем образования в организме плода или ребенка IgМ-АТ к IgG матери, что значительно осложняет интерпретацию результатов и установление диагноза врожденного сифилиса. Ложноотрицательные результаты реакции обусловлены наряду с техническими ошибками конкуренцией между IgМ и IgG, поскольку последний обладает большим аффинитетом. Отрицательной стороной РПГА служит то, что данный тест не может быть использован в качестве критерия излеченности заболевания, так как негативация таких реакций, как правило, затруднена, более того, они могут оставаться положительными в течение всей жизни.
К сожалению, все методы серологической диагностики сифилиса основаны на косвенном показателе наличия T. рallidum - АТ-ответе на бледную трепонему в крови пациентов. Это привело к тому, что до настоящего времени нет однозначного объяснения причины серологической резистентности и различий в сроках негативации у больных, получивших однотипное лечение, возникают проблемы установления достоверного диагноза врожденного сифилиса, не разработаны критерии определения жизнеспособности возбудителя сифилиса в организме хозяина.
Недостатки серодиагностики сифилиса послужили толчком к разработке молекулярно-генетических методов диагностики сифилиса, получивших широкое распространение в последние годы. Запатентованы способы ПЦР-диагностики сифилиса (метод определения специфицеских последовательностей ДНК T. pallidum , заключающийся в амплификации ДНК). Однако несмотря на целый ряд преимуществ ПЦР-диагностики, эти методы обладают и существенными недостатками, среди которых необходимо отметить их высокую стоимость, обусловленную дороговизной праймеров для ПЦР-диагностики и высокой стоимостью лабораторного оборудования, что ограничивает применение этих методов в лабораторной практике.
В связи с этим разработка современных недорогих, высокочувствительных и специфических методов лабораторной диагностики сифилиса является актуальной и представляет большое значение для медицинской науки и практического здравоохранения.
В настоящее время разрабатываются новые диагностические методы, основанные на выявлении молекулярных маркеров органных поражений при сифилисе методом газовой хроматографии и масс-спектрометрии (ГХ-МС). Привлечение в арсенал методов лабораторной диагностики сифилиса ГХ-МС позволяет с высокой степенью достоверности определить наличие T. pallidum в организме по наличию специфического молекулярного маркера. В соответствии с данными исследованиями было показано, что биохимический состав сыворотки крови больных сифилисом отличается от сыворотки здоровых доноров. В сыворотке крови больных сифилисом присутствуют липидные, углеводные и аминокислотные компоненты, которые могут служить молекулярными маркерами присутствия T. pallidum в организме (К.А.Осман, 2004). Также методом ГХ-МС были установлены химические соединения, являющиеся молекулярными маркерами органных поражений на ранних стадиях заболевания. По данным исследования К.А. Осман (2004 г.), такими соединениями при поражении ЦНС являются D-галактоза, D-трентол, глюкоза и ее циклический изомер - инозитол, при поражении печени - ароматические производные жирных кислот (фенилпропионовая и фенилуксусная кислота), аминокислотные фрагменты, липидно-белковый комплекс, при поражении костей - летучие жирные кислоты, липополисахариды и их субъединицы (С18-С20). Таким образом, привлечение в диагностический арсенал методов газовой хроматографии и масс-спектрометрии позволяет с высокой степенью достоверности определить наличие поражения органов и систем при отсутствии положительных серологических реакций и выраженных клинических проявлений болезни.

Сифилис многолик. Инфекция, попадая в организм, оставляет следы не только на кожных покровах и половых органах, но и разрушает нервную систему, опорно-двигательный аппарат, легкие, ухудшает слух и зрение. Несмотря на широкий спектр симптомов и вариантов их сочетаний, медики научились выявлять болезнь и безошибочно указывать стадию ее развития.

Общество желает защититься от заражения бледной трепонемой. А потому предусмотрен ряд экспресс-тестов для ранней диагностики сифилиса или выявления носителей инфекции. Правилом стал забор крови на лабораторную диагностику:

• в случаях беременности;
• перед операцией;
• у доноров перед сдачей крови или органов для трансплантации;
• у медицинских работников, учителей, воспитателей, работников сферы общественного питания и др.;
• у военнослужащих;
• у заключенных.

Лабораторный тест и клиническое обследование на сифилис проведут для:

• пациентов с признаками ЗППП;
• половых партнеров и других членов семьи человека с установленным диагнозом «сифилис»;
• младенцев, родившихся от больной матери;
• всех, у кого установлен диагноз другой болезни, передающейся половым путем;
• проверки эффективности терапевтического метода в ходе лечения;
• всех, у кого скрининг дал положительный результат.

Порядок обнаружения инфекции на приеме у венеролога

Из разговора с пациентом врач выясняет:

• есть ли подтвержденный диагноз «сифилис» у партнера;
• случались ли ранее высыпания на половых органах;
• воспалялись ли лимфатические узлы;
• имел ли место незащищенный секс 3-4 недели назад.

В ходе клинического осмотра кожи, половых органов, ануса, слизистых оболочек специалист выясняет схожесть высыпаний и других поражений кожи с теми, что характерны для сифилиса. Тщательно пальпируются периферические лимфоузлы для оценки степени их увеличения.

В случаях наличия сифилид (твердого шанкра, розеол, папул, гранулем) доктор назначает гистоморфологическое исследование. В лаборатории описывают внешний вид и изучают содержимое образования. По результатам судят о стадии заболевания.

Решающий вклад в диагностику сифилиса вносит лабораторный метод выявления возбудителя или следов иммунного ответа на заражение.

Диагноз устанавливают исходя из совокупности данных, полученных после клинического обследования и лабораторных тестов. В исключительных случаях, когда невозможно провести анализы, лечение назначают на основе осмотра.

Диагностика осложнений

Вторичный и третичный сифилис могут давать осложнения, называемые специфическими висцеритами. В процесс могут включаться все органы и системы, но чаще всего венерологи наблюдают поражения:

• печени;
• нервной системы;
• костей;
• сердца.

Особенно опасен сифилис для беременных женщин. Кроме осложненной беременности не исключено внутриутробное или вертикальное (в родовых путях) заражение плода, мертворождение.

Важно вовремя диагностировать не только инфекцию, но и вторичные заболевания. С этой целью кроме специфических тестов и общих анализов мочи и крови проводятся дополнительные обследования (Таблица).

Лабораторные анализы биологических материалов

Лабораторная диагностика сифилиса стала развиваться с 1905 года, когда был обнаружен возбудитель заболевания – бледная трепонема. До этого содержимым сифилид заражали кроликов, которые стопроцентно чувствительны к инфекции. Уже в 1906 году Вассерманом была разработана первая серологическая реакция на сифилис (RW). В 1949 году медицина предложила более специфичную реакцию иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), но RW не вытеснена из лабораторий до сегодняшнего дня.

На смену первым анализам приходят современные методы диагностики. Они отличаются по технике проведения и предназначению. В списке актуальных тестов:

• темнопольная микроскопия – предусматривает изучение мазка или соскоба для обнаружения трепонемы в исследуемом субстрате (в быту данное исследование иногда называют «мазок на сифилис»);
• молекулярно-биологические методы выявления специфической ДНК (полимеразная цепная реакция, ДНК-зондирование);
• серологическая диагностика сифилиса по сыворотке крови или спинномозговой жидкости.

Темнопольная микроскопия

Из очагов поражения берут пробы для микроскопического исследования на бледную трепонему. Объектами тестирования являются:

• содержимое сифилид;
• тканевая жидкость;
• ликвор;
• амниотическая жидкость;
• ткань пуповины.

Трепонема получила характеристику «бледная» благодаря устойчивости к действию большинства красителей. Живой микроб хорошо виден в темном поле со специальной подсветкой. Лаборант обращает внимание на морфологические признаки бактерий и наблюдает за характером их движения.

Для гистоморфологического исследования пробы окрашивают серебром (по Морозову) или по Романовскому-Гимзе.

Прямые методы микроскопии применяют для диагностики врожденного заболевания или поздних стадий сифилиса. Проверить его правильность можно прямой реакцией иммунофлюоресценции (РИФ-Тр) или полимеразной цепной реакцией (ПЦР). В первом случае выявить возбудителя помогают противотрепонемные антитела и флюоресцирующий краситель, а во втором – молекулы ДНК бледной трепонемы.

Поиск ДНК возбудителя

Даже единственную молекулу ДНК трепонемы можно обнаружить при анализе крови. Успехи в данной области стали возможными с 1991 года, когда был изобретен тест полимеразной цепной реакции (ПЦР). Носитель наследственной информации размножают в специальных температурных условиях и многократно копируют ферментом – ДНК-полимеразой. После, методом электрофореза, выявляются искомые фрагменты цепи.

Это вполне точный и специфичный тест. За рубежом он стал золотым стандартом диагностики сифилиса. В России ПЦР пока скорее исследовательский, чем клинический.

Другим способом выявляют трепонемы при ДНК-зондировании (гибридизации нуклеиновых кислот). В этом случае денатурированную ДНК соединяют со специфическим зондом. Изменение цвета фильтра, на который нанесены пробы, свидетельствует о заражении.

Серологические способы диагностики

Для различных целей диагностики могут использоваться серологические нетрепонемные и трепонемные тесты. В ходе анализа выявляют антитела к бледной трепонеме в крови.

В качестве экспресс-диагностики или скрининга рекомендуют обращаться к следующим нетрепонемным тестам:

• RPR – тесту быстрых плазменных реагинов (Rapid Plasma Reagins);
• RST – тесту отбора реагинов (Reagin Screen Test);
• TRUST – тесту с толуидиновым красным и непрогретой сывороткой (Toluidin Red Unheated Serum Test);
• USR – тесту определения активных реагинов плазмы (Unheated Serum Reagins);
• VDRL – лаборатории изучения венерических заболеваний (Venereal Disease Research Laboratory);
• микрореакции преципитации (МРП) с плазмой или инактивированной сывороткой;
• реакции связывания комплемента (РСК) и ее разновидности с кардиолипиновым антигеном (РСКк).

В основе методики – поиск антител (IgM и IgG) к липидам поврежденных клеток и липопротеинам мембран возбудителя. Положительный ответ названные анализы показывают уже через неделю после появления первых сифилид.

Антитела собственно к трепонеме выявляют методами:

• ELISA – иммуноферментного анализа – ИФА (Enzymelynked immunosorbent assay);
• FTA – реакции иммунофлюоресценции – РИФ (Fluorescent treponemal antibody);
• RW – реакции связывания комплемента (реакция Вассермана);
• RW с трепонемным антигеном – РСКт;
• TPHA – реакции пассивной гемагглютинации – РПГА (Treponema pallidum haemagglutination assay);
• TPI – реакции иммобилизации бледных трепонем – РИБТ или РИТ (Treponema pallidum immobilization test);
• Western Blot – иммуноблотинга.

Венерологи следуют определенному порядку проведения серологических тестов. В качестве экспресс-диагностики проводят один из нетрепонемных анализов. Учитывается низкая чувствительность в ранней и поздней стадиях инфицирования. Поэтому как отрицательные, так и положительные ответы при определенной клинической картине должны быть перепроверены трепонемными методами.

В разных жизненных ситуациях могут наблюдаться сочетания положительных и отрицательных ответов. Расшифровать их поможет таблица.

Окончательные выводы делает венеролог на основании комплекса данных: клинической картины, гистологических и лабораторных исследований.

Источники:

1. Аковбян В.А., Прохоренков В.И., Новиков А.И., Гузей Т.Н. // Сифилис: иллюстр. рук-во (ред. В.И. Прохоренков). – М.: Медкнига, 2002. – С. 194-201.
2. Дмитриев Г.А., Фриго Н.В. // Сифилис. Дифференциальный клинико-лабораторный диагноз. – М.: Мед. книга, 2004. – С. 26-45.
3. Лосева О.К., Ловенецкий А.Н. Эпидемиология, клиника, диагностика и лечение сифилиса: рук-во для врачей. – М., 2000.
4. Панкратов В.Г., Панкратов О.В., Навроцкий А.Л. и др. // Рецепт (приложение: Междунар. науч.-практ. конф. «Современные подходы к диагностике, лечению и профилактике инфекций, передаваемых половым путем», Гродно, 2005). – 2005. – С. 165-169.
5. Панкратов В.Г., Панкратов О.В. // Современные возможности лабораторной диагностики сифилиса и трактовка результатов исследования. – Минск, Белорусская медицинская академия последипломного образования, 2006.
6. Панкратов В.Г., Панкратов О.В., Крукович А.А. и др. // Здравоохранение. – 2006. – № 6. – С. 35-39.
7. Родионов А.Н. // Сифилис: рук-во для врачей. – СПб.: Питер, 1997. – С. 226-245.
8. Хурадо Р.Л. // ЗППП. – 1997. – № 3. – С. 3-10.
9. Шмидт Б.Л. // Первый Российский конгресс дерматовенерологов: тез. науч. работ. – СПб., 2003.– Т. II. – С. 40-41.
10. Romanowski B., Sutherland R., Flick G.H. et al. // Ann. Med. –1991. – V. 114. – P. 1005-1009.

Диагностика сифилиса представляет собой комплекс мероприятий, которые проводятся для того, чтобы установить, присутствует ли в организме человека возбудитель заболевания, на какой стадии формирования находится болезнь, чтобы решить как именно её необходимо лечить.

Обнаружить и уточнить такое заболевание самостоятельно полностью достоверно невозможно – сам больной может только выявить у себя признаки формирования сифилиса, например, твёрдый шанкр, сыпь, лимфоаденопатию. Возможны и случаи, когда сифилис протекает бессимптомно. Поэтому первичное обнаружение болезни происходит, чаще всего, двумя способами – во время профилактического осмотра, если человек не ощущает у себя никаких проявлений наличия трепонемы в организме, либо посредством осуществления специфических анализов и обследований.

Следом за обнаружением клинических признаков сифилиса происходит определение и постановка диагноза. Каким образом это происходит? Доктор производит осмотр и опрос пациента, выясняет, на что именно он жалуется, а далее назначает ему проведение лабораторных обследований и анализов.

В первую очередь, больному необходимо будет сдать общие и биохимические анализы крови и мочи, так как их показатели, например, повышенное значение лейкоцитов или СОЭ, дают медику понять, что у пациента есть проблемы со здоровьем. Далее ему назначаются специфические тесты по методам обнаружения трепонемы, а также методикам серологической диагностики.

Что представляют собой способы обнаружения трепонемы

После того, как доктор соберёт анамнез больного и проведёт первичный осмотр ротовой полости, половых органов, кожных и слизистых покровов, у него появляется базовая информация по поводу состояния обратившегося к нему пациента, однако этого недостаточно для постановки точного диагноза.

Среди методик обнаружения наличия бледной трепонемы в организме – темнопольная микроскопия, метод полимеразной цепной реакции, а также прямой реакции иммунофлюоресценции.

Микроскопические исследования, или темнопольная микроскопия. Для выявления микроорганизмов во взятом материале, его микроскопия проводится в тёмном поле. Использование этого метода объясняется тем фактом, что некоторые бактерии плохо поддаются окрашиванию или вовсе не окрашиваются специальными красителями. К тому же, изучение материала в тёмном поле даёт возможность изучить состояние живых бактерий, а так как темнопольная микроскопия не требует окрашивания, она отличается более низкой стоимостью и занимает меньше времени для проведения.

Для анализа отбирается содержимое кожных сифилитических образований – язв, папул, эрозий, в некоторых случаях – материал из периферических лимфоузлов.

Что может показать такой анализ? Обнаружение в биологическом материале движущихся бледных трепонем в любом количестве является доказательством наличия у обследуемого сифилиса. Отличить бледную трепонему от других, непатогенных спирохет, можно по количеству завитков.

Следует отметить, что такой метод является единственным объективным способом определить диагноз “сифилис”, если речь идёт о ранних, свежих, первичных формах, когда серологические анализы дают негативные результаты. Особенно ценны его показания при диагностировании нейросифилиса и состояния реинфекции.

Как производится забор материала? Эрозия или папула сначала обрабатываются антисептическим средством – так место отбора жидкости готовится к вмешательству медика. После этого на её поверхность производится надавливание тупым скальпелем – таким образом медик добивается выделения тканевого сока прозрачного жёлтого цвета. Кроме того, может осуществляться соскоб или взятие мазка со слизистых. Срок годности полученного материала достаточно мал, поэтому анализ должен осуществляться сразу после его забора .

По результатам исследования у больного можно диагностировать первичный или вторичный сифилис, а также ранний врождённый сифилис у ребёнка.

Положительные результаты рассматриваются как достоверное основание для определения заболевания. Если у человека не выявлены трепонемы, процедуру повторяют до трёх раз, до этого применяя к ране компрессы с физиологическим раствором.

Если есть подозрение на третичный сифилис, или сочетание сифилиса с онкологическими новообразованиями, темнопольное микроскопирование сочетается с окрашиванием по методу Романовского-Гимзе, или серебрением по Морозову.

Метод ПИФ. Отличается большей безопасностью для проводящего его персонала, чем темнопольное исследование. Трепонемы в мазках при этом зафиксированы, они не обязательно должны быть живыми, поэтому осуществлять такое обследование можно в любое время после отбора материала.

Для изучения у больного отбирается содержимое жидкости, отделяемой сифилидами, или тканевые срезы с областей кожных проявлений сифилиса, лимфатических узлов. Чувствительность метода составляет до 95%.

Метод ПЦР. С помощью полимеразной цепной реакции, результат обследования можно получить уже через несколько часов после забора материала. Его чувствительность достигает 98,6%.

Однако, несмотря на кажущиеся преимущества, методика практически не используется в России и Украине, так как его чувствительно и специфичность недостаточно хорошо изучена в сравнении с прямыми методами диагностики. ПЦР-скрининг используют как дополнительный способ диагностирования врождённого сифилиса, нейросифилиса, а также при затруднении диагностики сифилиса у ВИЧ-больных.

Изучение сыворотки крови таким способом неэффективно, для ПЦР отбирают содержимое сифилидов.

Серологические методики диагностирования

Серологическая диагностика назначается пациентам для подтверждения сифилиса, для выявления скрытого сифилиса, для контроля эффективности назначенного лечения, а также в профилактических целях.

Суть серологических реакций заключается в выявлении и вычислении иммунной реакции организма на попадание возбудителя болезни, и определении так называемых маркеров сифилиса.

На сегодняшний день, наиболее изученными антигенами к бледной трепонеме являются:

• протеиновые;
• антигены полисахаридной природы;
• липидные антигены.

Иммунный ответ организма производится посредством выработки клеточного (макрофагов и Т-лимфоцитов) и гуморального иммунитета (специфических иммуноглобулинов). При этом выработка антител к сифилису происходит по общему правилу – сначала появляются IgM, далее – IgG (суммарные антитела). Возможно также выделение антител классов IgA, IgE, IgG.

Сифилитические антитела могут быть специфическими и неспецифическими, направленными против аутоантигенов, а также против липидных антигенов трепонемы.

Именно серологические анализы дают возможность выявить наличие и концентрацию, а также тип выработанных к возбудителю антител. Все проводимые анализы делятся на несколько общих групп:

• липидные;
• групповые трепонемные;
• видоспецифичные протеиновые трепонемные реакции.

Наиболее часто медиками назначаются:

• иммуноферментные анализы;
• реакции пассивной гемагглютинации;
• реакции микропреципитации.

Иммуноферментная проба. Это лабораторное обследование основывается на высокой специфичности иммунологических реакций типа “антиген-тело”. ИФА имеет несколько модификаций, одна из которых – ELISA, или твердофазный гетерогенный иммунный анализ. Такая разновидность анализа назначается для определения присутствия антигенов классов А, М, G к возбудителю сифилиса. В основе диагностики лежит иммунная реакция антигена и антитела, а также учёт присоединения ферментной метки к антителам. Для изучения используется сыворотка крови больного материал берут из вены. Первая реакция происходит между Ig At и очищенным антигеном возбудителя Ag, который фиксируется к поверхности лунок иммунологического планшета.

Следующая иммунологическая реакция позволяет выявить связавшийся специфический иммуноглобулин, а также антитела к нему – конъюгат Ig At, отмеченный пероксидазой.

В зависимости от концентрации иммуноглобулинов в материале окраска может быть более или менее интенсивной. После завершения реакций, медики производят фотометрирование лунок и подсчёт результатов.

Для серодиагностики в этом случае используются полистирольные планшеты с 96 лунками. На их стенке заранее адсорбируются антигены. Далее исследуемая сыворотка вводится в ячейки, а гомологичные антигену антитела прикрепляются к нему. Оставшиеся антитела удаляются смыванием. Следующий шаг – внесение в лунки меченных ферментами антител против иммуноглобулинов. Если в изучаемой сыворотке крови есть определяемые антитела, они сработают как антигены, с которыми прореагируют меченые антитела.

После промывки в сыворотку вносится краситель, который позволяет визуализировать и учесть реакцию по интенсивности окрашивания. Концентрация антител в единице объёма подсчитывается по изменению оптической плотности жидкости в конкретной ячейке.

Реакция ИФА в комплексе с другими реакциями позволяет определить наличие антител к сифилису, вирусным гепатитам, ВИЧ-инфекции, хламидиям, цитомегаловирусу. Для первичной диагностики сифилиса её назначают вместе с реакцией микропреципитации, однако при этом следует помнить, что обнаружение антител в крови свидетельствует только о контакте обследуемого с возбудителем в прошлом или настоящем. Результат можно получить уже через несколько суток.

Изучая результаты, а именно класс выявленных антител, медик может определить стадию инфекционного процесса. При этом такие данные, как количество выявленных антител, к сожалению, не имеет значения для установления точного диагноза или выработки тактики лечения.

Методика ИФА, чаще всего, применяется как анализ, подтверждающий тест на сифилис, в то время как в качестве контрольной проверки для определения излечения от болезни его не делают.

Реакция пассивной гемагглютинации. Один из видов отборочных реакций. У не леченых и ранее лечившихся больных в ранних и поздних стадиях заболевания отмечается самая высокая чувствительность и наиболее точный результат – до 99,6% .

Его недостатком является тот факт, что реакция может давать отрицательные результаты только в небольшом количестве случаев, поэтому она не является адекватным методом контроля лечения. Однако среди всех методик диагностики сифилиса именно РПГА является наиболее часто применяемой микробиологической реакцией – она отличается простотой, высокой чувствительностью и дешевизной. Кроме того, в процессе можно использовать антиген Рейтера.

В чем заключается суть РПГА? Она основывается на выявлении агглютинации эритроцитов, на поверхности которых зафиксированы антигены бледной трепонемы. При этом агглютинация происходит только при наличии антитрепонемных антител. Впервые эта идея появилась в 1965 году, и с тех пор активно применяется для серодиагностики сифилиса.

Реакция назначается для подтверждения любой стадии заболевания. При условии совмещения её с тестом ОРС, нет необходимости проводить больному комплекс серологических реакций. Самостоятельно такой анализ не применяется, его ценность можно определить только в сочетании с ОРС и РИФ.

Единственный минус этого способа диагностики – необходимость ждать некоторое время после предполагаемого заражения, так как в первые 4 недели после контакта с больным отрицательный результат анализа будет сомнительным. При первичной стадии болезни, реакция показывает низкие титры (до 1:320), во время вторичной титры реакции возрастают. При скрытом сифилисе титры снова снижаются.

Следует отметить, что после перенесённой болезни реакция РПГА остаётся положительной на всю жизнь, поэтому такой результат в качестве контроля качества лечения считается ложноположительным.

Материал, который подлежит изучению в данном случае – кровь, взятая из вены человека. В среднем, объективный результат можно получить уже на следующий день после сдачи анализа.

Реакция микропреципитации. Производится с кардиолипиновым антигеном, другое название – RPR или РМП, относится к нетрепонемным тестам. Заключается в определении реагенов – антител типа M и G, которые образуются в ответ на антигены липидного происхождения, полученные в ответ на повреждение здоровых клеток возбудителем сифилиса.

Реакция назначается как первичное обследование на сифилис, в порядке медицинских осмотров и контроля результативности лечения.

Скрининговый тест способен определить наличие антифосфолипидных антител, и его можно назвать более прогрессивной заменой RW, которая ещё называется реакцией Вассермана. Анализ может определить в сыворотке крови наличие антител, появляющихся спустя 3-5 недель после заражения, то есть примерно спустя 10 дней после появления первого шанкра, до этого срока результат реакции может быть ложным. Кроме крови из пальца или вены, исследованию может подвергаться спинно-мозговая жидкость, которая берётся посредством проведения пункции.

В 78% случаев первичного сифилиса тест будет положительным, вероятность определения наличия вторичной формы заболевания значительно выше – до 97%.

Если RPR показывает положительный результат, доктор назначает последующие анализы – ИФА, РПГА, РИФ, чтобы проверить, не является ли он ложным. Одна из причин, почему результат может показать положительные значения, не соответствующие действительности – наличие в крови антител к фосфолипидам.

В процессе проведения анализа фиксируется агглютинация липидных частиц с холестерином и кардиолипином. Антитела к фосфолипидам подсоединяются к кардиолипину, вызывая их агглютинацию. У больных сифилисом осуществляется аналогичная реакция – у таких пациентов ложноположительный тест проверяется отрицательным результатом специфических анализов на сифилис, которые проводятся для выявления антител к трепонемным антигенам. Ложноположительная реакция может быть результатом присутствия в организме некоторых аутоиммунных заболеваний, например, системной красной волчанки. Транзиторно-положительная реакция определяется у беременных с мононуклеозом, малярией, ветряной оспой, туберкулёзом, хламидиозом.

По окончанию успешного лечения реакция RPR становится отрицательной у 90% пациентов.

Как происходит диагностика с назначением микропреципитации? Сначала пациенту проводится отборочная реакция RPR, или любая её модификация в количественном и качественном варианте. Если анализ положительный, далее больному назначается любой специфический трепонемный тест в качестве дифференциальной диагностики заражения именно сифилисом.

По завершению лечения пациенту проводится реакция МР, а по снижению полученного титра лечащий врач может отследить динамику выздоровления и эффективности терапии. Если результаты показывают уменьшение показаний титров в 4 и более раз за год, лечение считается эффективным.

Расшифровка результатов: ложные, ошибочные, ложноположительные, ложноотрицательные

Почему при появлении первых же признаков и симптомов сифилиса следует сразу обратиться к доктору? Дело в том, что даже если самостоятельно сдать анализы в ближайшей лаборатории, правильно расшифровать их показатели может только квалифицированный .

Любые типы серологических тестов назначаются обычно как экспресс-диагностика, или при прохождении медосмотров. Их результаты могут быть отрицательными, слабоположительными, если концентрация антител не достигает определённого уровня, или положительными. Кроме того, каждый тип анализа может быть ложноположительным или ложноотрицательным. Положительные реакции нетрепонемных тестов обычно проверяются результатами специфических трепонемных.

Трепонемные серологические обследования также могут быть отрицательными, сомнительными, слабоположительными или положительными. Например, иммуноблоттинг назначается с целью подтвердить или опровергнуть результаты первичного обследования. Выявление антител типа IgG и IgM в крови отмечается полосками.

Если и неспецифический первичный скрининг, и специфическая серологическая реакция показывает отрицательный результат, значит, человек здоров, либо заражение произошло менее 10 дней назад.

Положительная реакция у беременных также может присутствовать при нетрепонемном скрининге, однако если далее был проведён иммуноблоттинг-тест, и он дал отрицательный результат, это означает отсутствие заболевания.

Может ли ошибка закрасться в результаты теста? Всегда существует некоторая вероятность, что анализ показал ошибочные результаты. Поэтому в процессе диагностирования доктор должен обращать внимание и на внешние факторы, которые не зависят от пациента.

Ложноположительные тесты могут появляться, если у человека присутствует:

• сахарный диабет;
• алкогольное или наркотическое опьянение;
• корь, мононуклеоз, гепатит;
• болезни сердца;
• опухоль любого типа;
• беременность;
• аутоиммунное заболевание.

Большинство типов тестов могут выявить присутствие болезни, но только если она достигла определённой стадии развития. Например, RW покажет наличие заражения со 100-процентной вероятностью, но только спустя месяц после попадания возбудителя в организм. Третичный сифилис отображается в результатах RW с вероятностью до 75%.

Ранние стадии более целесообразно диагностировать посредством осуществления ИФА-тестов. Если у человека отсутствуют другие заболевания, его достоверность стремится к 96%.

Отрицательный показатель может свидетельствовать об отсутствии заболевания. Сомнительный результат – причина для назначения повторного обследования. Если у пациента обнаружены антитела к сифилису, это не повод для паники – квалифицированное и вовремя подобранное лечение может справиться с болезнью, если она присутствует, без каких-либо опасных последствий.

Кресты, прочерки и плюсы в расшифровке анализа: как понимать

Результаты некоторых серологических тестов могут выдаваться в виде таблицы, где в колонках указываются кресты или прочерки. Как происходит расшифровка такого результата?
Так, например, МР или реакция микропреципитации рассчитывается в цифровом эквиваленте, показывая количественный титр инфекции.

RW (реакция Вассермана) подразумевает получение показателей теста в виде:

• прочерка (отрицательный тест);
• одного или двух крестов (слабоположительный);
• трёх крестов (положительный);
• четырёх крестов (резко положительный тест).

Наличие даже одного креста в результатах – основание для назначения следующих анализов уточняющего характера. Прочерк в таблице не гарантирует абсолютно точного отсутствия болезни.

Результаты РИФ также обозначаются в виде плюсиков или крестов – от одного до четырёх. Если у человека показан прочерк (минус) – значит, сифилис отсутствует. Результаты в виде одного, двух, 3 крестов или 4 “плюсиков” говорят о наличии болезни.

РПГА не даёт никаких количественных ассоциаций в результате – он показывает либо полное отсутствие болезни, или её присутствие в прошлом или настоящем.

Результаты ИФА расшифровать более сложно. Они представлены в виде таблицы классов антител IgA, IgM и IgG. Возле каждого значения стоит прочерк либо крест. Сопоставляя наличие или отсутствие конкретного типа антител, лечащий врач может сделать вывод о стадии болезни, давности заражения.

После проведения комплексного обследования на сифилис, доктор сводит все полученные результаты в единую расширенную таблицу, пользуясь методикой плюсов и минусов. Проставляя кресты и прочерки в зависимости от того, был ли результат конкретного анализа положительным или отрицательным, лечащий врач может составить картину заболевания.

Требования по подготовке к сдаче анализов

Как готовиться к предполагаемому тесту на сифилис? Забор материала для исследования может проводиться из вены или пальца, если речь идёт об анализе крови. Соблюдение специальной диеты для этого не требуется, но сам забор крови производится натощак – кушать нельзя как минимум за 4 часа до процедуры, а в некоторых случаях следует не есть за 12 часов перед взятием материала.

Если пациенту предстоит сдача материала для выявления ДНК трепонемы, её нужно проводить до начала терапии антибиотиками.

Сбор спинномозговой жидкости проводится только в стационаре. Нет никаких ограничений в питании или образе жизни до назначенной процедуры.

Так же просто сдаются соскобы с поверхности глаза. Что касается мазков и соскобов с кожи, главные требования – не пользоваться никакими местными косметическими или медицинскими средствами до изъятия материала.

Снятие соскоба и мазка из половых органов требует более тщательной подготовки, например, чтобы пациент за 3 суток до назначенной процедуры воздерживался от интимных контактов, диагностических медицинских манипуляций. Кроме того, женщинам нельзя делать спринцевание или пользоваться вагинальными свечами и таблетками.

Экспресс-тесты на сифилис: можно ли диагностировать болезнь самостоятельно

Современная медицинская наука шагнула настолько далеко вперёд, что сегодня существуют даже экспресс-тесты для определения наличия сифилиса в домашних условиях.

Тест для домашнего обследования человека на наличие сифилиса позволяет определить, есть ли заражение организма.

В аптеках можно приобрести специальный набор для самоанализа, например, для обследования слюны или крови. В качестве подготовки к подобной процедуре нужно следовать всем описанным в инструкции требованиям. Если производится анализ крови, перед процедурой нельзя кушать в течение минимум 5 часов.

Наборы для самостоятельного анализа крови предполагают взятия всего 1-2 капель крови через небольшой прокол в коже. Его делают с помощью специального устройства со стерильным острым наконечником или иглой. В течение нескольких минут прибор может определить присутствие антигена в крови.

Некоторые наборы предлагают устройства только для взятия материала на исследование, который далее нужно направить в лабораторию для исследования. Следует отметить, что отобранный материал годен для обследования в течение короткого срока – если не доставить его в лабораторию в этот же день, результат нельзя будет считать действительным.

В любом случае, при наличии подозрения на сифилис нужно как можно быстрее обратиться к доктору, даже если тесты в домашних условиях показали отрицательный результат.

Диагностика сифилиса включает в себя целый комплекс мероприятий, в котором центральная роль отведена, безусловно, специальным анализам и тестам. У больного могут отбирать спинномозговую жидкость, кровь из вены или пальца, мазки и соскобы с кожи и слизистых, тканевую жидкость из ран и повреждений покровов, с целью обнаружить как самих возбудителей болезни, так и антитела к ним.

В целом, диагностика сифилиса основывается на анализе клинико-лабораторных данных. Диагноз устанавливается специалистом!

Специальность: инфекционист, гастроэнтеролог, пульмонолог .

Общий стаж: 35 лет .

Образование: 1975-1982, 1ММИ, сан-гиг, высшая квалификация, врач-инфекционист .

Научная степень: врач высшей категории, кандидат медицинских наук.