Медицине известны инфекции, практически незаметные для больного человека по причине своего вялого и бессимптомного течения. К числу подобных коварных заболеваний относится хламидиоз, возбудителей которого не показывают привычные плановые анализы и .

Обнаружить опасные бактерии даже тогда, когда инфекция находится в стадии инкубационного периода, помогает анализ крови на хламидии методом ПЦР.

Что это такое, где можно сдать этот анализ и как к нему правильно подготовиться?

Одним из самых распространенных заболеваний половой сферы, поражающим как мужчин, так и женщин, является хламидиоз. Его возбудитель, которого удается без труда обнаружить лишь методом ПЦР – . Что это за организм, и почему он настолько неуловим?

Проблема в том, что хламидии являются бактериями уникального типа, отличающимися атипичными механизмами размножения и жизнедеятельности.

Но как только иммунная система хозяина дает сбой, провоцированные бактериями воспалительные процессы набирают силу, и дают о себе знать рядом симптомов.

Именно при следующих жалобах пациенты чаще всего обращаются к врачу для прохождения ПЦР диагностики хламидиоза:

• Неприятные ощущения при мочеиспускании.
• Зуд в области половых органов.
• Выделения патологического характера из влагалища и полового члена.
• Частые позывы в туалет.
• Незначительные сбои в менструальном цикле у женщин.
• Вялость, недомогание, повышение температуры.

Поскольку клиническая картина не имеет ярко выраженных признаков, диагностировать хламидиоз удается лишь после проведения исследования по одной из утвержденных Минздравом технологий:

• Экспресс-тест.
• Соскоб на хламидиоз.
• Культуральный метод.
• или мазок на хламидии методом ПЦР.

Каждый из перечисленных видов диагностики характеризуется определенным процентом достоверности, а также рядом преимуществ и недостатков.

Определить анализ, необходимый в конкретном случае, способен только лечащий врач – гинеколог, уролог или венеролог.

Хламидиоз, который вовремя не обнаружили, становится причиной спаек в органах малого таза, вызывает хронический уретрит, бесплодие, мертворождение.

Инфекция, полученная во время беременности, нередко провоцирует самопроизвольный аборт. Хламидиоз матери передается новорожденному малышу при прохождении через родовые пути, провоцируя у малыша серьезные заболевания органов зрения и дыхания.

Именно по этим причинам своевременная диагностика хламидиоза столь важна. Кроме того, человек может являться носителем болезнетворных бактерий и быть опасным для общества, даже не догадываясь об этом.

• Частая смена половых партнеров.
• Игнорирование современных методов контрацепции.
• Половой акт супруга/супруги с другим человеком.
• Наличие подтвержденного заболевания у случайного или постоянного партнера.
• Частые выкидыши.
• Наличие признаков, указывающих на присутствие зппп.

Почему при наличии данных показаний, стоит попытаться обнаружить хламидии ПЦР-методом? Что это за анализ и почему его результатам стоит доверять больше, чем остальным?

Общая информация об исследовании

Метод ПЦР или полимеразная цепная реакция на хламидиоз – высшая точка эволюции в области лабораторной диагностики.

Это молекулярный анализ, основы которого были изобретены в 70-х годах прошлого века в качестве эксперимента.

Суть метода заключается в многократном копировании выделенного участка ДНК до состояния, в котором возможна визуальная детекция инородных организмов.

Уникальность анализа заключается в его простоте, чувствительности и точности.

Преимущества

В отличие от большинства методов, применяемых в микробиологии, данный анализ позволяет экономить время.

Кроме того, обнаружение болезнетворных бактерий возможно даже при условии их малой концентрации, а также в течение инкубационного периода.

Данные критерии важны для гинекологии и урологии, поэтому для диагностики , микоплазмы и хламидий анализ на ПЦР является самым оптимальным видом исследования, позволяющим исключить дополнительные анализы.

Помимо высокой точности, ПЦР имеет ряд иных преимуществ:

• Анализ диагностирует инфекцию очень быстро – лаборанту хватает одного дня.
• Обнаружить хламидиоз на ПЦР можно сразу после инфицирования.
• Внешние факторы и состояние здоровья пациента оказывают минимальное влияние на достоверность результата.
• Для диагностики требуется немного материала.

Где и как сдавать анализ на ПЦР на хламидии

Для РФ метод ПЦР не в новинку с середины 90-х годов прошлого столетия. Сегодня сдать анализ можно практически в любой клинике – как в бюджетной, так и в платной. Срок предоставления результатов варьируется в пределах 1-2 дней.

Как сдавать ПЦР на хламидии? Мужчинам и женщинам перед проведением анализа специалисты дают некоторые рекомендации, позволяющие достичь максимальной надежности результата:

Мазок на ПЦР на хламидии берут из влагалища или из мочеиспускательного канала. Врачи не рекомендуют ходить в туалет за 3 часа до сдачи анализа, а также заниматься сексом в течение 3 дней до исследования. Кроме того, желательно воздержаться от банных процедур накануне проведения диагностики.

Перед тем, как брать материал на ПЦР на хламидии у женщины или мужчины, специалист подробно рассказывает о сути диагностики. Он поясняет, что требуется от пациента, и что будет делать лаборант.

– это тоже работа лечащего врача. Однако большинство учреждений предоставляет анализ с традиционной формулировкой, не требующей объяснений – «отрицательно» или «положительно».

Вконтакте

20.10.2018

Хламидийная инфекция или хламидиоз — болезнь, которую вызывают микроорганизмы хламидии.

Опасные хламидии Chlamydia psittaci и pecorum. Этот вид хламидий находиться только в человеческом организме.

Микроорганизмы устойчивы к влиянию внешней среды и не погибают до 2-х суток. Гибнут при температуре не менее 100 градусов в течение одной минуты, погибают при обработке их антисептиком.

Причины заражения хламидийной инфекцией

Причины заражением урогенитальным хламидиозом:

• способ передачи инфекции при сексуальном контакте;
• бытовой способ инфицирования;
• внутриутробное заражение плода;
• инфицирование ребенка в момент родов.

При половом способе заражения, попадание бактерий в организм происходит в момент незащищенного презервативом полового акта.

При бытовом способе, заражение этой инфекцией происходит от не соблюдения интимной гигиены и совместного пользованиями предметами гигиены.

При внутриутробном заражении, ребенок инфицируется от зараженной матери. Хламидия попадает в организм ребенка уже на первом месяце зачатия, а также ребенок может заразиться во время родов, в момент прохождения по родовым путям.

Диагностика инфекции хламидиоз

Заболевание хламидиоз в организме человека в основном проходит в скрытой форме, и проявление этой инфекции происходит спустя 21 день после попадания в организм.

Внешнее обследование больного не может быть гарантией поставленного диагноза хламидиоз. Для того, чтобы установить правильный диагноз, необходимо провести ряд исследований:

• серологические исследования;
• микробиологические анализы;
• пройти метод генетического зонда;
• анализ на содержание иммуноферментов;
• ПЦР — диагностическая проверка.

Диагностику начинают с соскоба с уретры или влагалища, а также берется мазок выделения с уретры, влагалища и маточных выделений. По результатам данного анализа видна полная картина инфицированности хламидиозом. После того, как появился метод полимеразной цепной реакции, появилась возможность более точно определять наличие хламидий, уреаплазма и микоплазма в организме.

Имунноферментатный анализ выявляет наличие бактерий точностью от 60 до 70 процентов.

Также для диагностики хламидиоза проводят бакпосев, который определяет наличие хламидий в организме, а также выявляет чувствительность инфекции к антибиотикам.

Для установки диагноза используют мазок, соскоб, сперму, мочу и кровь.

Диагностика методом полимеразной цепной реакции

— это эффективный метод для определения в организме наличие микроорганизмов Chlamydia psittaci и Chlamydia pecorum. Такое исследование достаточно точное, для выявления инфекции, которая передается половым путем.

Очень часто анализ ПЦР на хламидии, уреаплазма, микоплазма назначается женщинам в период вынашивания ребенка. Хламидии очень опасны для внутриутробного для развития плода. Данная инфекция может привести к патологиям у будущего ребенка.

Принцип данного метода основан на обнаружении в материале для исследования генетический код возбудителя инфекции. Для проведения полимеразной цепной реакции используют любой биологический материал человека – кровь, сыворотку, мазки, соскобы, выделения из половых путей, мочевого канала, сперму.

Данные вещества, на основании которых проводится анализ, могут быть загрязнены гнойными выделениями, мочой — на качество результата это не влияет.

Их помещают в специальный реактор, в который к материалу добавляют ферменты, которые и синтезируют с материала ДНК или РНК.

Если такие гены есть, то это признак инфекции. ПЦР хламидии обладает самой высокой точностью — в пределах 95 процентов и выше.

Полимеразная цепная реакция выполняется от 24 часов до 48 часов. Время выполнения анализа зависит от реактивов, которые используются при методе полимеразной цепной реакции.

Подготовка организма к анализу ПЦР

Для того, чтобы правильно провести анализ , необходимо подготовиться:

• за несколько дней не принимать антибиотики и антибактериальные средства;
• не мочиться до забора соскоба с уретры минимум в течение 3 часов;
• перед сдачей крови на анализ — не заниматься сексом 2 — 3 дня;
• минимум за 2 дня прекратить прием контрацептивов и других лекарственных средств;
• процедуры интимной гигиены необходимо провести без мыла и вечером накануне перед анализом;
• минимум за 3 дня до ПЦР не принимать алкоголь;
• кровь для ПЦР сдается на пустой желудок;
• во время менструации анализ ПЦР не делается.

По результатам всегда видно, какое количество микроорганизмов хламидии, уреаплазма и микоплазма находится в организме человека. Иногда количество хламидий находится в пределах нормы и тогда лечение не требуется на данном этапе.

Если количество бактерий сhlamydia psittaci и сhlamydia pecorum превышает показатель 10 в 4 степени, тогда лечения заболевания хламидиоз не избежать. При назначении лечения необходимо учитывать количественный показатель инфекции, а также чувствительность сhlamydia psittaci и сhlamydia pecorum к различным группам антибиотиков.

Метод полимеразной цепной реакции при заболеваниях организма

Назначается диагностика ПЦР:

• в период вынашивания ребенка;
• при хламидиозе у сексуального партнера;
• при беспричинном бесплодии;
• при признаках хламидиоза.

ПЦР назначают также при обнаружении признаков и симптомов некоторых заболеваний:

• СПИД;
• гепатит В и С;
• уреаплазмоз;
• микоплазмоз;
• кандидоз;
• гарднереллез;
• трихомониаз;
• инфекционный мононуклеоз;
• туберкулез;
• папилломавирусная инфекция (ВПЧ);
• герпес.

Преимущества метода полимеразной цепной реакции

По сравнению с анализами и тестами, которые применяются для обнаружения половых и венерических инфекций, метод полимеразная цепная реакция имеет преимущества:

• высока чувствительность препаратов на инфекцию хламидия, уреаплазма, микоплазма , что позволяет диагностировать данную инфекцию как в острой форме развития заболевания хламидиоз, так и в хроническом периоде болезни;
• высочайший уровень специфичности данного метода;
• сжатые сроки проведения исследования.

При острой (свежей) стадии заболевания, метод ПЦР обнаруживает хламидии в самых малых количествах в организме.

При хронической стадии хламидиоза, когда очень сложно обнаружить бактерии в организме, метод ПЦР отлично справляется с диагностикой заболевания на такой стадии хламидиоза.

Лечение заболевания хламидиоз

Хламидийная инфекция — лечение требует длительного времени, процесс этот довольно сложный.

Урогенитальный хламидиоз лечат совместно врач иммунолог и гинеколог женский организм, и врач иммунолог и уролог для лечения мужского организма.

Основные препараты, которые используются в лечение — это антибиотики разных групп и направлений:

• макролиты;
• тетрациклины;
• фторхинолоны.

Вместе с антибиотиками в процессе лечения участвуют:

• поливитамины;
• иммуномодуляторы;
• препараты карсил, фестал;
• противогрибковые препараты;
• пробиотики.

Женщины, у которых хламидии находятся в половой сфере, вместе с лечебными препаратами назначают спринцевание и вагинальные антисептические тампоны.

У мужчин применяют местное лечение болезни при помощи ионофореза, клизм, свечей и массажа простаты.

Для лечения хламидии трахоматис в организме, назначаются следующие лекарственные средства:

• Азитромицин 500 мг 1 раз в день;
• Доксициклин 0,1 мг 2 раза в день;
• Левофлоксацин 500 мг 1 раз в день;
• Эритромицин 500 мг 4 раза в сутки;
• Офлоксацин 300 мг 2 раза в сутки;
• Рокситромицин 150 мг 2 раза в сутки;
• Спирамицин 3 мг 3 раза в сутки.

По необходимости больному предписывают экстракты лекарственных трав, которые укрепляют иммунитет: эхинацеи, элеутерококка, аралии.

Для нормализации микрофлоры в организме, назначают поливитамины и обязательно пробиотики. Схему лечения составляет специалист и в этом случае самолечение противопоказано.

Заражение хламидией трахоматис – частая неприятность для сексуально активных людей. Если они пренебрегают методами барьерной контрацепции и не отказывают себе в ежегодной смене сексуальных партнеров.

Особенности этого микроорганизма таковы, что они имеют все шансы не только проникнуть в организм человека. При любом виде коитуса (вагинальном, анальном, оральном), хламидии успешно попадают внутрь клеток, образуя внеклеточную форму (элементарное тельце). И пережидают неблагоприятные времена в виде вегетативных L-форм. Эта разновидность инфекционных агентов проявляет свойства бактерии и вируса одновременно. Обладают собственной двойной мембраной и клеточным содержимым. Внутриклеточный кокк, тем не менее, активно пользуется органеллами клеток хозяина. Размножается в них и выбирается в межклеточное пространство в уже размноженном состоянии. Для удачного прикрепления к поверхности клетки многослойного плоского эпителия половых путей, мочевыводящего тракта, элементарное тельце во внешней части своей оболочки имеет специфические белки.

Патогенность микроорганизма тем лучше, чем активнее он выделяет внутренний токсин. При попытке избавиться от него антисептиками или методами физического воздействия, возбудитель трансформируется. Образует неделящуюся форму, которая умудряется избежать даже воздействия ряда антибиотиков. Все это определяет высокую инфицированность населения Земли (до10% взрослого мужского населения и до 30 процентов женщин). Инфекция способна длительно находиться в организме в скрытой форме.

Дает хроническое течение хламидийным инфекциям половых органов, мочевыводящих путей, ротоглотки, сердечнососудистой системы, суставов, глаз. Мощные белковые антигены хламидий нередко запускают и каскады аутоиммунных процессов с выработкой антител против собственных тканей и органов человека.

Результатом этого становятся аутоиммунные тиреоидиты, синовииты, системные заболевания соединительной ткани и суставов. Хламидия сохраняет за собой лидирующие позиции в качестве виновника вторичного женского и мужского бесплодия. Поэтому актуальность своевременной и достоверной диагностики хламидиоза чрезвычайно высока.

ПЦР на хламидии

Практически универсальным биологическим материалом для исследования становится венозная кровь, забранная натощак.

Однако следует помнить, что очаг поражения инфекцией может располагаться в местах далеких от вены, из которой забиралась кровь. Рекомендуется выполнять исследование соскобов эндотелия мочевыводящих и половых путей. Т.е. уретры, влагалища, цервикального канала. Также соскобы из прямой кишки, рта, глотки, конъюнктивального мешка. Возможна диагностика с использованием мочи, спермы, простатического секрета, цереброспинальной жидкости, слюны, раневого отделяемого или смывов. То есть на анализ направляется материал из очага воспаления. Данная методика позволяет получить результат в течение первых суток от доставки материала в лабораторию. Может считаться экспресс-методом. Метод качественный. Ответ лаборатория выдает в виде отметки на бланке: “обнаружено” (положительный) и “не обнаружено” (отрицательно). Расшифровка должна обязательно быть показана лечащему врачу. В ходе анализа ведется поиск фрагментов хламидийной специфичной дезоксирибонуклеиновой кислоты. Порог чувствительности – это 100 копий ДНК в образце. В отличие от бактериоскопии и посевов, где границей нормального бактериального роста считается 10 в 4 степени колониеобразующих единиц.

Показания для обследования:

• Клиника урогенитального хламидиоза (дизурия, выделения из уретры или влагалища).
• Подозрение на хламидиоз мочевыводящих путей или гениталий.
• Поиск внутриутробной инфекции.
• Планируемая беременность (за 2месяца), в том числе, ЭКО.
• Наступившая беременность (при беременности тесты проводятся до 22 недель или при наличии клиники половой инфекции).
• Мужское бесплодие, тератозооспермия, астенозооспермия.
• Женское бесплодие (особенно вторичное).

• Невынашивание беременностей, преждевременные роды, смерть ранее рожденных младенцев в постнатальном периоде, уродства или задержки внутриутробного развития у плодов.
• Эпизоды незащищенного секса.
• У лиц, имевших за последние двенадцать месяцев двух и более половых партнеров.
• С целью оценки излеченности от хламидиоза (с момента окончания антибактериального курса должно пройти не менее тридцати суток).

Гемотест предполагает забор венозной крови натощак (предшествующий прием пищи за четыре часа до исследования).

У женщин полимеразная цепная реакция соскобов эндотелия цервикального канала или влагалища и уретры предпочтительно выполнять в первой половине менструального цикла. Не ранее пятых суток от начала последней менструации). Если исследование проводят о вторую половину цикла, то оно должно отстоять от следующего менструального кровотечения на семь-пять дней. Забор материала может проводиться в день обращения. Для соскоба из уретры обязательно воздержание от мочеиспускания в течение двух часов до анализа.

Если возможно провести предварительную подготовку к исследованию. То она должна исключить применение местных антисептиков за две недели до исследования. Пероральных антибиотиков–за месяц. В день забора материала и накануне противопоказано спринцевание. Соскобы выполняются во время осмотра гинекологом или венерологом на кресле. Материал забирается из влагалища, цервикального канала и уретры.

Как сдавать мужчинам соскобы, чтобы результат был максимально достоверным?

• Не применять антибиотики внутрь в течение месяца, местные антисептики – четырнадцать суток.
• Не заниматься сексом и не мастурбировать 48 часов.
• Не мочиться два часа.

Соскоб выполняется из уретры на приеме у уролога или венеролога. Для этого в уретру на глубину 4 сантиметров вводится урологический зонд. При необходимости соскобы выполняются из области прямой кишки. ротоглотки или конъюнктивы глаз.

Как собирается моча?

В стерильную лабораторную посуду (обычно одноразовый пластиковый контейнер) собирают 20-30 мл утренней мочи. Эякулят собирается в день исследования лаборатории. Простатический секрет – урологом после массажа простаты. Требования к подготовке аналогичны таковым при сборе материала соскобов из уретры.

Выявление ДНК хламидий в цереброспинальной жидкости требует спинальной пункции в условиях специализированного стационара. Могут ли быть ситуации, когда ДНК не определяется при ПЦР? Да, если хламидий в организме нет или количество копий ДНК ниже пороговой чувствительности исследования. В случаях микст-инфекций (например, хламидиоз и герпес, хламидиоз и трихомонады или гонококки) могут потребоваться дополнительные ПЦР или серологические исследования на другие группы возбудителей половых инфекций.

Анализ ПЦР хламидии

На сегодня ПЦР один из самых прогрессивных и достоверных методов диагностики хламидиоза разных локализаций.

ПЦР имеет ряд преимуществ перед другими методами лабораторной диагностики:

• Обладает очень высокой чувствительностью к ДНК возбудителя.
• Стопроцентно специфична. То есть не принимает генетический материал хламидий за аналогичный других возбудителей, не путает хламидий с другими клетками и инфекционными агентами.
• Может применяться в период до развития клиники (в инкубации). При стертом течении или хроническом варианте инфекции дает такие же точные результаты, как и при остром процессе.
• Нет строгой привязки к конкретному биологическому материалу: исследоваться могут разные клетки и ткани организма.
• Годится в качестве экспресс-метода. Делается в течение суток, реже до трех дней.
• Ведется именно поиск возбудителя, а не косвенных признаков его присутствия (антитела крови).
• В том же материале, который исследуется на предмет хламидиоза, могут быть методом ПЦР выявлены другие возбудители половых инфекций (уреаплазма, микоплазма, герпес).

Недостатков у методики немного. Однако они присутствуют:

• Ложноположительные результаты. У пролеченных по поводу хламидиоза пациентов остатки ДНК возбудителя могут давать ложноположительный ответ анализа.
• Прямая связь с качеством лаборатории. Приличный ПЦР-тест возможно провести только в лаборатории, оснащенной всеми расходными материалами. Поэтому в системе ОМС часто ПЦР-диагностику заменяют малоинформативной микроскопией.

Как сдавать анализ ПЦР и сколько стоит конкретное исследование, можно уточнять в лаборатории, где предстоит обследование.

ПЦР мазок на хламидии

В некоторых случаях возможно исследование мазков слюны методом полимеразной цепной реакции.

Показания к такому исследованию аналогичны таковым при выполнении соскобов из горла и рта. Это:

• Подозрение на хламидиоз ротоглотки.
• Стойкий кашель, сопровождаемый подъемами температуры.
• Пневмонии неясного происхождения.
• Лихорадка неясного генеза.

Условия, которые важно соблюсти перед забором материала на исследование:

• Не проводить анализ на фоне лечения антибиотиком (мораторий две недели).
• В течение шести часов до забора материала не орошать полость рта антисептиками и не пользоваться антибактериальными препаратами для рассасывания.
• Непосредственно перед выполнением анализа прополоскать рот водой комнатной температуры.

Тест является качественным. Результаты интерпретируются аналогично таковым при ПЦР для других биологических материалов (кровь, соскобы эндотелия). В бланке ответа выставляется пометка “обнаружено” или “не обнаружено”. Сроки выполнения исследования – до двух суток. При необходимости – несколько часов. Полимеразная цепная реакция, как разновидность генотипирования хламидии трахоматис, является наиболее удобным методом.Это самое качественное выявление инфекционного агента в разные стадии инфекционного процесса. Сложности диагностики тем не менее присутствуют. Бесплатные клиники не имеют достаточного финансирования. Они не могут предложить своим пациентам ДНК-типирование на основные виды возбудителей половых инфекций бесплатно.

Нередко лаборатории этих лечебных учреждений попросту не снабжены расходными материалами для подобных исследований. Пациенту приходится направляться в частную лабораторию или клинику, в идеале сопряженную с этой лабораторией. Диагностика должна как предварять лечение, так и завершать его спустя месяц после антибактериального курса, оценивая эффект от проведенной терапии. Сдать тесты можно, обратившись к урологу, гинекологу или венерологу. Любой из этих специалистов не только назначит анализы, но и оценит их результаты, а также даст клинически грамотные рекомендации по ведению патологии.

Возбудитель мочеполового хламидиоза – Chlamidia trachomatis - микроорганизм, способный размножаться только внутри клетки (чаще всего клетки эпителия мочеполовых органов). Хламидиоз часто характеризуется скрытым и бессимптомным течением, чем и обусловлена частота возникающих на его фоне осложнений.

Долгое время, до создания метода амплификации нуклеиновых кислот, диагностика хламидиоза была затруднена, так как при обычном микроскопическом исследовании возбудитель не виден. Была попытка внедрения цитологического метода с окраской мазка по Романовскому-Гимзе и выявлением специфических внутриклеточных включений.

Но такой метод требовал значительных затрат экономических ресурсов, времени, наличия опытного квалифицированного лаборанта. И это все при низкой информативности данного метода - порядка 10%.

Показать всё

1. Введение

Более подробно о хламидиях трахоматис (Chlamydia trachomatis) и путях заражения можно узнать в этой статье (). А здесь мы подробнее остановимся на методах диагностики мочеполового хламидиоза и расшифровке возможных результатов анализов.

Самой первой серологической пробой, внедренной для подтверждения диагноза "урогенитальный хламидиоз", была реакция связывания комплемента (сокращенно РСК). Проба быстро утратила свою актуальность из-за высокой частоты ложноположительных результатов.

На протяжении двух десятков лет одним из самых информативных способов диагностики урогенитального хламидиоза считался метод прямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител. На фоне вышеперечисленных методов он отличался несколько более высокими показателями специфичности и чувствительности. Вместе с тем, метод требовал обеспечения лаборатории дорогостоящим оборудованием и реагентами.

Еще один метод, актуальный и по сей день, – выявление хламидий в культуре клеток. Этот метод будет описан ниже.

Так или иначе, сейчас повсеместно распространен другой анализ на хламидии - исследование отделяемого или соскоба из уретры, влагалища или цервикального канала методом ПЦР.

1. 1 ПЦР-диагностика. Федеральными и Европейскими клиническими протоколами для диагностики урогенитального хламидиоза рекомендован метод амплификации ДНК. В отношении первичного выявления инфекции его специфичность равна 100%, чувствительность 98-100% (уровень доказательности А, уровень обоснованности I).
2. 2 NASBA (метод амплификации РНК).
3. 3 Выделение хламидий в культуре клеток.
4. 4 Цитологический метод. Этот метод исследования мазка малоинформативен при диагностике мочеполового хламидиоза (специфичность 10-12%): есть небольшая вероятность обнаружения внутриклеточных включений – так называемых телец Гальбершетдера-Провачека. Помимо этого, при микроскопии проводится подсчет числа лейкоцитов (увеличение их количества - доказательство воспалительного процесса), а также исследование флоры и обнаружение дрожжеподобных грибков.
5. 5 Серологические тесты.
6. 6 Последние три метода (3,4,5) могут применяться только в определенных ситуациях, когда недоступны методы амплификации ДНК и РНК (ПЦР и NASBA).

Анализы на хламидии назначаются:

1. 1 Скрининг половых инфекций при беременности и предгравидарная подготовка.
2. 2 Желательно ежегодно сдавать анализы женщинам и мужчинам в возрасте до 25 -30 лет, а также лицам, не имеющим постоянных партнеров на протяжении последнего года или недавно сменившим партнера.
3. 3 Лицам, имеющим симптомы уретрита, вагинита, цервицита.
4. 4 Женщинам с ВЗОМТ (сальпингоофорит, эндометрит и так далее).
5. 5 При обнаружении у пациента любой другой половой инфекции.
6. 6 Мужчинам молодого возраста с воспалением придатков яичка и орхитом.
7. 7 При подготовке к внутриматочному вмешательству.
8. 8 При пневмонии и гнойном конъюнктивите у новорожденного.

2. ПЦР на Chlamydia trachomatis

Суть метода ПЦР - обнаружение генетического материала (ДНК) в исследуемом образце и его достраивание путем добавления «строительного» материала (дезоксинуклеорибофосфатов). В результате цепь ДНК удлиняется, ее обнаружение становится возможным с помощью электрофореза и/или флюоресценции.

Все манипуляции выполняются в специальном приборе – амплификаторе, который самостоятельно контролирует смену температур и протекающих фаз соответственно числу необходимых циклов амплификации.

ПЦР позволяет обнаружить хламидии уже через 3 дня после заражения, при высоком риске исследование повторяют через 2 недели после предполагаемого инфицирования.

В настоящее время набирает большую популярность . С его помощью исследуется и качественная, и количественная характеристика влагалищной микрофлоры.

ПЦР в режиме реального времени характеризуется короткими сроками выполнения, высокой специфичностью и чувствительностью (порядка 88-90%).

Но для подтверждения урогенитального хламидиоза ряд авторов рекомендуют использовать монокомпонентные наборы для ПЦР из-за более высокой их чувствительности (100%) в отношении хламидий трахоматис.

Совет этот актуален в ситуации, когда врач подозревает наличие хламидийной инфекции у пациентки, и исследование проводится для верификации диагноза. При отсутствии специфических симптомов у женщины более целесообразно проведение комплексной ПЦР (уровень обоснованности II).

3. Амплификация РНК хламидий (NASBA)

Это относительно новый для России, но более информативный молекулярно-биологический метод. Суть его заключается в обнаружении в материале (мазке, соскобе, моче и так далее) цепей РНК, наличие которых сопровождает процесс построения и жизнедеятельности клетки хламидии.

РНК является транспортировщиком генетической информации от ДНК и строителем клеточных структур возбудителя путем синтеза белка.

Именно по наличию РНК в положительных результатах NASBA можно судить об эффективности проводимой антибактериальной терапии: оценивается жизнеспособность хламидий. ПЦР, основанная на обнаружении только ДНК, такой возможности не имеет.

NASBA может применяться для контроля излеченности в более ранние сроки по сравнению с ПЦР. Для контроля эффективности лечения данный метод актуален по прошествии всего 14 дней после последнего приема антибиотиков.

4. Как правильно сдавать анализ на хламидии женщинам?

Женщины анализ на хламидии методами ПЦР или NASBA могут сдать у врача-гинеколога, дерматовенеролога.

Материалами для исследования у женщин обычно служат:

• Соскоб из уретры, влагалища, цервикального канала вне менструации. Условием является наличие в забранном материале клеток эпителия. При взятии обычного мазка, слизистого отделяемого, гноя и тому подобного, результат может быть не информативным.

Соскоб на анализ у женщин берут из наружного отверстия уретры, цервикального канала и заднего свода влагалища.

1. 1 При использовании универсального зонда: после взятия материала рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующим раствором.
2. 2 При использовании ложечки Фолькмана: ее ополаскивают в пробирке с консервирующим раствором. После этого емкость плотно закрывают, а инструмент дезинфицируют и стерилизуют.
• Первая порция свободно выпущенной мочи. Именно в первой порции мочи сосредоточено максимальное количество слущенных эпителиальных клеток урогенитального тракта. У женщин первая порция свободно выпущенной мочи менее информативна (чувствительность 80-90%), поэтому применяется намного реже, чем соскоб. При этом нет доказательств, что утренняя моча более диагностически значима, чем, например, дневная (уровень обоснованности II).

Моча собирается пациенткой самостоятельно в чистый стерильный сухой контейнер. Для исследования достаточно порядка 10 мл мочи. Рекомендуемый период хранения - 24 часа при соблюдении необходимого уровня температур (+2С…+8С).

5. Особенности забора материала у мужчин

Мужчины сдать анализы на хламидии могут у врача-уролога, врача-дерматовенеролога, врача-репродуктолога, андролога.

Материалами для исследования у мужчин обычно служат:

• Отделяемое из уретры, соскоб из уретры. Подготовка пациента: перед забором материала не мочиться 2-3 часа, при обильных выделениях - 15-30 минут. При наличии обильных патологических выделений (например, гноя) рекомендуется удалить их ватным тампоном.

Процедура взятия соскоба для мужчин достаточно неприятна, порой болезненна. Соскоб забирается универсальным зондом из наружного отверстия уретры. После забора рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующей жидкостью.

• Первая порция свободно выпущенной мочи (чувствительность выше, чем у женщин - 85-95%).
• По показаниям для анализа на хламидии у мужчин может забираться секрет предстательной железы (при бесплодии, простатите и др. заболеваниях). Подготовка включает половое воздержание в течение 2 дней. Секрет простаты берет квалифицированный специалист после массажа предстательной железы. Головку полового члена необходимо очистить стерильным ватным тампоном.

После завершения массажа выделившийся сок предстательной железы в количестве 0,5-1 мл собирают в сухую пробирку «Эппендорф» и плотно закрывают. При отсутствии секрета - собирают первую порцию мочи (в ней и будет содержаться весь секрет) по аналогии с обычной вышеописанной техникой.

Максимальный срок хранения всех вышеперечисленных материалов – 24 часа при строгом соблюдении температурного режима в диапазоне +2С…+8С.

Доставляется материал в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами. Для долгосрочного хранения взятый материал необходимо заморозить на срок не более 1 месяца при температуре -20С. Допускается только однократное размораживание материала.

6. Расшифровка результатов ПЦР и NASBA

1. 1 Как правило, результаты ПЦР и NASBA доступны уже через 24-36 часов, в частных лабораториях сроки готовности результатов удлинены.
2. 2 Результат может быть "положительный" (хламидии обнаружены, то есть у пациента хламидиоз) и "отрицательный" (хламидии не обнаружены, то есть у пациента мочеполового хламидиоза нет или получен ложноотрицательный результат).

При использовании методов амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) для грамотной интерпретации результатов необходимо соблюдать некоторые условия:

1. 1 Контрольное исследование для оценки эффективности терапии назначается не ранее, чем через 1-1,5 месяцев после окончания приема препаратов (для ПЦР), и не ранее, чем через 14 дней для NASBA. Метод ПЦР не подразумевает определение жизнеспособности обнаруженных микроорганизмов, поэтому необходимо выждать полный цикл смены эпителия.
2. 2 При сборе первой порции мочи после последнего акта мочеиспускания необходим перерыв не менее 3 часов. При обильных патологических выделениях из уретры мочу собирают через 15-20 минут после последнего акта мочеиспускания.
3. 3 Существует мнение, что изменения гормонального фона приводят к появлению в исследуемом материале ингибиторов амплификации (слизь, кровь, гной и другие компоненты). Данная ситуация наиболее актуальна в период беременности, у женщин.

Предлагалось множество способов устранения данной проблемы, но пока ни один из них не является общепризнанным:

1. 1 Ситуация с ингибиторами амплификации актуальна для небеременных женщин на 3 неделе после менструации.
2. 2 При заборе материала в первые дни после менструации есть вероятность ложноотрицательного результата за счет недостаточного накопления возбудителя в эпителии. Таким образом, оптимальный период для взятия соскоба – 4 неделя после менструации.
3. 3 Нет никакой необходимости в специальной подготовке пациентки (например, введения каких-либо препаратов, соблюдения определенной диеты) перед исследованием. На результат это не повлияет.
4. 4 Существует проблема так называемого конкурентного ингибирования. Подобная ситуация возникает при использовании лабораторией наборов для ПЦР-диагностики нескольких видов микроорганизмов. При значительном преобладании в образце какого-либо одного вида возбудителя последний может "замаскировать" наличие других видов микроорганизмов. Результат будет ложноотрицательный.
5. 5 При подозрении на ложноположительный результат возникает необходимость повторного исследования. Эта ситуация актуальна при бессимптомном течении инфекции с низкой бактериальной нагрузкой. В этом случае возможно исследование того же образца, либо забор нового, а также применение другого теста или даже метода исследования (класс рекомендаций В, уровень обоснованности II). При выявлении большого количества хламидий в исходном материале повторное исследование будет лишним и экономически необоснованным.

7. Иммуноферментный анализ

Согласно последним Федеральным рекомендациям, иммуноферментный анализ (ИФА) не применяется для диагностики неосложненного урогенитального хламидиоза (цервицитов, уретритов и др.). Такое «недоверие» обусловлено тем, что ИФА больше актуален для тяжелых, глубоких поражений хламидиями C. Trachomatis.

Метод ИФА основан на обнаружении в крови специфических антител, вырабатываемых в ответ на антигены хламидий. По сочетанию трех классов иммуноглобулинов в крови пациента можно судить о тяжести и длительности инфекционного процесса.

Как уже было сказано, данный метод при выявлении урогенитального хламидиоза имеет ряд недостатков:

1. 1 Не информативен в диагностике восходящей инфекции, цервицита и уретрита.
2. 2 Высокая частота перекрестных реакций.
3. 3 Высока частота ложноположительных реакций.
4. 4 Не подходит для контроля излеченности после проведенной антибактериальной терапии, так как неизвестно время существования в крови специфических антител;
5. 5 Позволяет диагностировать преимущественно глубокие поражения, например, врожденный хламидиоз у новорожденных (класс рекомендаций А, уровень обоснованности I).

Для проведения ИФА используется венозная кровь пациента, взятая натощак. В защиту данного метода можно отметить:

1. 1 Его более низкую стоимость, по сравнению с ПЦР.
2. 2 Удовлетворительная специфичность порядка 90%.
3. 3 Быстрота выполнения.
4. 4 Простота забора и хранения материала.

8. Выявление хламидий в культуре клеток (на среде McCoy)

Этот метод уникален тем, что позволяет оценить не только качество проведенной терапии, но и определить чувствительность хламидий к различным группам антибактериальных препаратов.

Суть метода состоит в заражении обработанной культуры клеток забранным материалом с последующим посевом на питательную среду и инкубированием в течение двух суток. Наличие хламидий в полученных клетках определяется методом ПЦР.

Для определения чувствительности к антибиотикам в обработанную культуру клеток вносят ростовую среду с содержанием определенного антибактериального средства и инкубируют в течение 5 суток.

Эффективность препарата определяют по отсутствию или замедлению роста в определенных группах. Наличие роста свидетельствует о резистентности к добавленному в питательную среду антибиотику.

Недостатки этого метода диагностики - длительность (7 дней) и дороговизна, поэтому в клинической практике он используется в крайне редко. Обычно показанием для его назначения служит длительная неэффективная антибактериальная терапия.

9. Экспресс-методы

За рубежом в качестве рутинных, недорогих методов выявления хламидийной инфекции используются модифицированные серологические тесты.

9.1. Тест-система Chlamidia-antigen ELISA medac

Тест-система работает по принципу твердофазного ИФА-анализа. Готовая тест-система покрыта полученными путем генной инженерии, готовыми специфическими антителами. Данные антитела связаны со специальным ферментным комплексом.

При связывании антигенов с антителами ферменты высвобождаются, появляется желто-зеленое свечение, интенсивность которого и учитывает спектрофотометр.

В отличие от распространенного ИФА, где материалом для исследования служит кровь, при использовании данной тест-системы субстратом служат мазок или соскоб, взятые у женщины, мужчины. Чувствительность этого метода - около 65-70%, а специфичность 90-100%.

9.2. РИФ

В основе реакции иммунофлюоресценции (РИФ) лежит прямое связывание антигенов с мечеными антителами, дающими зеленое свечение. Хламидийные тельца подсвечиваются внутри клетки. Результат оценивается при люминисцентной микроскопии.

Чувствительность данного метода - около 50%, что связано с высокой частотой ложных результатов. Это обусловлено и субъективным восприятием результата (исследование проводит лаборант), и высокой вероятностью перекрестных реакций, и нарушением техники забора биологического материала. С помощью данного метода невозможно оценить эффективность проведенного лечения.

На фоне всех недостатков главными плюсами РИФ остаются низкая стоимость, простота выполнения и короткие сроки получения результата. Именно поэтому РИФ еще используют в некоторых странах в качестве рутинного исследования на мочеполовой хламидиоз.

Содержание

Серьезная инфекция, чаще передающаяся половым путем, опасна тяжелыми последствиями. Лабораторные методы диагностики – анализы крови на хламидии – помогают выявить заболевание, приступить к его лечению. Какие особенности имеют обследования, насколько информативны все их разновидности, как происходит расшифровка результатов – вопросы, на которые интересно получить ответы.

Chlamydia trachomatis – что это

• при незащищенном половом акте;
• бытовым путем;
• при беременности от инфицированной матери ребенку;

• для мужчин болезнь опасна развитием простатита, импотенции, хламидийной пневмонии;
• у женщин хламидии провоцируют выкидыши, спайки в малом тазу, преждевременные роды, опухоли матки.

Диагностика хламидиоза

Заболевание длительный период после заражения может быть бессимптомным. Часто хламидиоз выявляется при диагностике других половых инфекций. Из-за особенностей биологического цикла возбудителя анализы проводят несколькими способами. Лабораторная диагностика хламидиоза включает методы исследования:

• первичный микроскопический анализ мазка;
• культуральный способ – посев биоматериала в специальную среду – дает точный результат;
• РИФ хламидиоза – определение реакции иммунофлюоресценции – возбудители светятся под микроскопом, отличается достоверностью.

Анализ на хламидии

Самую точную диагностику по выявлению хламидийной инфекции имеют анализы крови. Производят их по нескольким методикам, имеющим свои особенности. Основные виды обследования:

• Иммуноферментный анализ – ИФА. По количеству антител Igg, Igm, Iga определяется, какая фаза в данный момент наблюдается у заболевания – острая, хроническая или ремиссия.
• Полимерно цепная реакция – ПЦР. Обнаруживает ДНК возбудителя, является очень надежным методом диагностики.

• осуществившим незащищенный секс с новым половым партнером;
• женщинам, имеющим частые недомогания вследствие заболеваний малого таза;
• обоим партнерам при планировании беременности, чтобы не заразить ожидаемого малыша;
• женщинам, имеющим проблемы вынашивания ребенка;
• пациентам с невыясненными причинами бесплодия.

Кровь на хламидии забирается из вены. Для получения объективных результатов врачи рекомендуют соблюсти требования:

• делать анализы не ранее месяца после лечения антибиотиками;
• не иметь половых контактов в ближайшие суток до момента обследования;
• не курить за полчаса до забора крови;
• приходить на исследование на голодный желудок;
• за день не употреблять алкоголь;
• не пить воду перед проведением анализов;
• исключить выполнение физиопроцедур.

ПЦР на хламидии

При этом методе исследования хламидиоз в крови определяется по количеству ДНК микроорганизмов, которые находятся в отобранном образце. Анализ полимерной цепной реакции – ПЦР – отличается очень высокой точностью и чувствительностью. Результат получается быстрый и достоверный. Его считают положительным при большом количестве хламидий в пробе для исследования – подтверждается причина инфицирования. Преимущество метода – при его помощи выявляются инфекции:

• в скрытой форме;
• малосимптомные;
• при острой стадии.

Большую опасность хламидиоз представляет для женщины, ожидающей рождения малыша. Велика вероятность внутриутробного заражения. Вовремя проведенная диагностика поможет начать лечение на ранней стадии, избежать серьезных проблем. Анализ ПЦР хламидии назначают гинекологи для исключения инфицирования, когда у беременной наблюдаются симптомы:

• повышенная температура;
• болезненность внизу живота;
• плохое самочувствие.

Анализа крови ПЦР является универсальным. С его помощью определяется не только возбудитель хламидиоза, но и других инфекций – герпеса, туберкулеза, гепатита. При расшифровке возможны два варианта результатов:

• отрицательный – свидетельствует об отсутствии заражения организма;
• положительный – показывает, что инфицирование произошло, и каким видом бактерий.

ИФА на хламидии

С первых дней инфицирования организм начинает продуцировать антитела к хламидиям в крови. На защиту от болезни встают три вида иммуноглобулинов, которые называются Igg, Igm, Iga. Иммуноферментный анализ – ИФА на хламидиоз не только точно определяет их наличие, но констатирует стадию, в которой находится заболевание. Это связано с появлением каждого из антител на конкретном этапе инфицирования.

При исследовании крови методом ИФА иммуноглобулины выявляются в такие сроки:

• после заражения сразу появляется Igm, если два других отсутствуют – диагностируют острое воспаление, важен при обследовании новорожденных;
• через месяц после инфицирования образуются антитела Iga, которые говорят о прогрессировании болезни;
• появление Igg сигнализирует о переходе хламидийной инфекции в ее хроническую форму.

Расшифровка анализа на хламидии

Интерпретация результатов обследования имеет тонкости, поэтому должна проводиться квалифицированными специалистами. Анализ крови на хламидии ИФА расшифровывается по каждому виду иммуноглобулинов, говорит о периоде развития инфекции. При определении Igm результаты таковы:

• Положительный: со времени заражения прошло менее, чем две недели; если не обнаружены другие антитела, при наличии Igg, – обострение хронического воспаления.
• Отрицательный: хламидиоза нет – при отсутствии всех иммуноглобулинов; когда определяется Igg – заражение произошло не менее двух месяцев назад.

При анализах крови на наличие антител Iga результат трактуется так:

• Положительный: острая стадия хронический инфекции или при заражении, с момента которого прошло более двух недель; инфицирование ребенка при беременности.
• Отрицательный: хламидийное воспаление отсутствует; со времени заболевания менее 14 дней; невелика вероятность заражения плода.

При расшифровке теста на Igg выдаются такие результаты:

• При норме – отсутствуют, значение коэффициента позитивности в границах 0–0,99;
• Положительный: заболевание хламидиозом или его обострение произошло более трех недель назад.
• Отрицательный – в случае одновременного отсутствия иммуноглобулинов Iga Igm: хламидий в крови нет; полное выздоровление.

Где сдать анализы на хламидиоз

Тем, кто почувствовал признаки заболевания, имел незащищенный секс со случайным партнером, можно приобрести в аптеке экспресс-тест. С его помощью быстро определяется наличие заражения хламидиозом. Для анализа нужна моча или мазок у женщин. В инструкции описан метод их забора. Результат расшифровывается так:

• положительный – требует немедленного обращения к венерологу для назначения лечения лекарствами;
• отрицательная проба свидетельствует, что заболевание в момент проведения теста отсутствует.

Сдать анализы на хламидиоз можно по направлению врача- венеролога или гинеколога. Не исключено самостоятельно обращение пациента в медицинские учреждения при подозрении на инфицирование. Анализ крови на хламидиоз проводят такие организации:

• женские консультации;
• клиники планирования семьи;
• кожно-венерологические диспансеры;
• специализированные лаборатории для проведения исследований.

Сколько стоит анализ на хламидиоз

Сделать анализы на хламидии можно в клиниках или специализированных центрах, оказывающих такие услуги. Стоимость находится в зависимости от статуса учреждения, имеющегося оборудования. Играет роль классификация специалистов, занимающихся расшифровкой результатов. Цена анализа на хламидии в медицинских организациях Москвы сведена в таблицу:

Видео: как сдавать анализ крови на хламидии

Внимание! Информация, представленная в статье, носит ознакомительный характер. Материалы статьи не призывают к самостоятельному лечению. Только квалифицированный врач может поставить диагноз и дать рекомендации по лечению, исходя из индивидуальных особенностей конкретного пациента.

Нашли в тексте ошибку? Выделите её, нажмите Ctrl + Enter и мы всё исправим!